[发明专利]一种小麦谷氨酰胺合成酶基因的克隆与鉴定方法无效
| 申请号： | 201210492359.6 | 申请日： | 2012-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN102965383A | 公开（公告）日： | 2013-03-13 |
| 发明（设计）人： | 王小纯;马新明;李高飞 | 申请（专利权）人： | 王小纯 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 450002 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种小麦谷氨酰胺合成酶基因的克隆与鉴定方法，该方法包括以下步骤：利用Trizol试剂盒提取小麦组织总RNA，DNaseI处理后DEPC处理水定容，利用1％的琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性；cDNA合成采用20μL反应体系，42℃温浴1h；GS1全长cDNA克隆；GS2全长cDNA克隆；利用半定量PCR鉴定小麦GS1和GS2基因表达的方法，通过获得cDNA，利用表1中的引物进行PCR扩增，产物于琼脂糖凝胶电泳鉴定。本发明首次从普通小麦栽培品种叶片中克隆了GS1和GS2的全长cDNA，探索了GS1和GS2在小麦不同组织中转录与表达特点，不仅为进一步研究其在小麦生长发育过程中的调控方式及在氮素利用中的作用奠定了基础。更为通过转基因方法选育氮高效品种提供了材料。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小麦 谷氨酰胺 合成 基因 克隆 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种小麦谷氨酰胺合成酶基因的克隆与鉴定方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：利用Trizol试剂盒提取小麦组织总RNA，DNaseI处理后DEPC处理水定容，利用1％的琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性；cDNA合成采用20μL反应体系，42℃温浴1h；GS1全长cDNA克隆；GS2全长cDNA克隆；利用半定量PCR鉴定小麦GS1和GS2基因表达的方法，通过获得cDNA，利用表1中的引物进行PCR扩增，产物于琼脂糖凝胶电泳鉴定。
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