[发明专利]一种人类PMSCS体外免疫调控淋巴细胞分子机制的检测方法无效
申请号: | 201210506446.2 | 申请日: | 2012-12-02 |
公开(公告)号: | CN103018457A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 徐杰;房文峰;朱爱华 | 申请(专利权)人: | 吴卫江 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N21/64;G01N23/00 |
代理公司: | 常州市维益专利事务所 32211 | 代理人: | 何学成 |
地址: | 214041 江苏省无*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提出一种人胎盘来源的MSCs体外表现为抑制T细胞活性及增殖作用机制的检测方法。鉴于协同共刺激分子在T细胞活化增殖中所起的重要作用,本发明大胆推测胎盘来源的MSCs体外表现出对T细胞负性调控作用可能系其高表达负性协同刺激分子PD-L1有关,首先通过实验验证PMSCS对活化T细胞具有明显抑制作用,再以负性协同刺激分子PD-L1为切入点,通过流式细胞仪检测、免疫荧光染色、3H-TdR掺入法、ELISA等实验分析PD-L1在PMSCS介导的T细胞体外增殖抑制作用中所扮演的角色,从而验证PD1-PD-L1分子通路是PMSCS体外调节T细胞免疫耐受的主要信号机制。 | ||
搜索关键词: | 一种 人类 pmscs 体外 免疫 调控 淋巴细胞 分子 机制 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种人类PMSCS体外免疫抑制作用分子机制的检测方法,其包括下述步骤: S1:PMSCS分离培养与鉴定; S2:免疫荧光染色法检测PMSCS中PD‑L1表达; S3:PD‑L1mAb阻断PMSCS对T细胞增殖的抑制作用检测; S4:PMSCS与T细胞体外共培养及PD‑L1阻断实验; S5:T细胞活性早期标志CD69的检测; S6:PMSCS对活化T细胞周期影响的检测; S7:PMSCS对活化T细胞细胞因子分泌影响的检测。
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