[发明专利]相思树花粉离体培养活力检测技术

摘要

本发明公开了一种相思树树花粉离体培养活力检测的方法，是于早上7点钟前采集含有多穗当日开放花序的未被昆虫采访的新鲜花枝，花序切成多段，将含有15～20%蔗糖、100～150mg/L的硼酸和0.25/L～0.5mmol/L硝酸钙的培养液滴于凹玻片凹槽内，用镊子夹取2～3段花序在液体培养基中涮1圈至花粉直接沉落培养基中，不盖玻片，播种后将凹玻片置于垫有湿润滤纸的培养皿内培养，8小时后用光学显微镜常规方法观察花粉发芽数量。本方法简单，完全定量，数据可靠，可操作性强，具有较高的实际应用价值，提高相思树育种效率，有效解决现有种子园的产量和质量问题，极大地发挥相思树树种的经济效益、社会效益和生态效益。

主权项

一种相思树花粉离体培养活力检测方法，包括液体培养基的配制、花枝采摘、花粉播种、培养、光学显微镜观察计数发芽花粉等工序；其特征在于：在相思树花开时节，采集含有多穗新鲜花序的花枝，从花枝上摘取当日开放的新鲜花序分切成多段，以水沉法播种，在一定的温度、湿度、富氧环境条件下培养使其发芽，具体操作步骤如下：(1)液体培养基的配制：用蔗糖、硼酸、硝酸钙、去离子水按一定的浓度混合均匀；(2)花枝采摘：剪取有多穗已全面开放花序的新鲜花枝，下端插入装有清水的小桶，拿回试验室备用；(3)花粉播种：取凹玻片平放于桌面，用滴管取配制好的培养基2～3滴滴于凹玻片的凹槽内，用镊子摘取花序以水沉法播种，播种后不盖盖玻片；(4)花粉培养：取干净大号培养皿，底部垫上滤纸，滴入去离子水将滤纸浸湿，将凹玻片平放入培养皿中，置于一定环境条件下培养； (5)光学显微镜观察：培养一定时间后将凹玻片置于光学显微镜下观察花粉发芽状况。