[发明专利]同步检测向日葵黑茎病菌和向日葵茎溃疡病菌的三重PCR引物及其扩增方法和用途

摘要

本发明公开了一种同步检测向日葵黑茎病菌和向日葵茎溃疡病菌的三重PCR引物及其扩增方法和用途，涉及3套引物，即Leptosphaeria lindguistii和Diaporthe helianth通用引物，L.lindguistii特异引物和D.helianth特异引物。通用引物扩增序列作为所有菌株菌丝基因组DNA提取模板的质量监控，L.lindguistii特异引物和D.helianth特异引物针对L.lindguistii和D.helianthi两个基因位点同时进行PCR扩增。L.lindguistii和D.helianth通用引物及各自特异引物可用于两种菌的菌丝基因组DNA三重特异PCR扩增。

主权项

一种同步检测向日葵黑茎病菌和向日葵茎溃疡病菌的三重PCR引物，其特征在于，实现两种检疫性真菌病害同步分子检测的特异引物，序列如下：向日葵黑茎病菌的特异引物：LLF：TAG CAT TGT TAG CCG AGGLLR：CAG CCA GTC TTC TAG CTT GG向日葵茎溃疡病菌的特异引物：DHF：CGA GAA ATC GTC CGT GATDHR：ATA CGG TCG GAC AGA CCA所述LLF/LLR扩增片段为255bp，DHF/DHR扩增片段为394bp，特异引物用于向日葵黑茎病菌和向日葵茎溃疡病菌的菌丝基因组DNA特异三重PCR扩增。