[发明专利]一种制备α1-抗胰蛋白酶的方法有效

专利信息
申请号: 201210544015.5 申请日: 2012-12-14
公开(公告)号: CN102993298A 公开(公告)日: 2013-03-27
发明(设计)人: 蔡骏;李泽林;刘波;初毅波;邓红;吴强 申请(专利权)人: 成都蓉生药业有限责任公司
主分类号: C07K14/81 分类号: C07K14/81;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18
代理公司: 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 代理人: 李高峡;全学荣
地址: 610041 四川*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 发明提供了一种制备α1-抗胰蛋白酶的方法,它包括如下步骤:a.沉淀溶解b.PEG沉淀;c、病毒灭活;d、纯化;e.超滤;f、纯化;g.超滤透析;i.除菌分装,冻干。本发明方法采用改良Kistler和Nitschmann法工艺的废弃组分沉淀FIV来制备α1-抗胰蛋白酶,既解决了长期困扰的K-N工艺或其改良工艺制备α1-抗胰蛋白酶的难题,实现了血浆资源的综合利用,又对血浆蛋白主体分离工艺无干扰影响,PEG4000用量少,操作体积小,不使用离心设备,简化工艺,节省设备投入具备了很好的应用前景。
搜索关键词: 一种 制备 胰蛋白酶 方法
【主权项】:
一种制备α1‑抗胰蛋白酶的方法,其特征在于:它包括如下步骤:a.沉淀溶解:采用低温乙醇法中的改良K‑N法组份Ⅳ沉淀溶解于8‑12倍体积的pH8.1‑9.0的缓冲液中,常温分散搅拌1小时,30‑40℃加热搅拌1小时,常温搅拌4‑14小时,得溶解液;b.PEG沉淀:将a步骤溶解液冷至5℃,加入PEG3000‑6000,PEG浓度为6‑10%(g/ml),搅拌1小时,用酸调整pH值至5.05‑5.35,加入1.0‑2.0%助滤剂,搅拌过滤得到滤液,滤液用碱调到pH7.0;c.病毒灭活:用S/D法灭活;d.纯化:采用阴离子交换层析纯化;e.超滤;f.纯化:采用阳离子交换层析纯化;g.超滤透析;h.15nm纳米过滤;i.除菌分装,冻干。
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