[发明专利]一种抗BP180 NC16A IgE抗体的酶联免疫检测试剂盒及检测方法无效
申请号: | 201210548486.3 | 申请日: | 2012-12-17 |
公开(公告)号: | CN103278640A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 左亚刚;刘冰;孙秋宁 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院北京协和医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京市德权律师事务所 11302 | 代理人: | 刘丽君 |
地址: | 100730*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种抗BP180 NC16A IgE抗体的酶联免疫检测试剂盒及检测方法,属于IgE检测方法技术领域。该试剂盒包括检测试剂,检测试剂的制备方法包括表达、提纯、浓缩抗BP180 NC16A蛋白;将浓缩的抗BP180 NC16A蛋白稀释至500μg/mL,得到抗原包被液;对抗原包被液进行包被后封闭,得到检测试剂。该检测方法以该试剂盒为基础,包括一抗孵育,二抗孵育,显色,显色终止后以酶标仪读取各样本试剂盒在波长为450nm、参考波长为620nm处的吸光度,根据吸光度得出检测结果。该试剂盒及检测方法灵敏度高且具有特异性。该试剂盒及检测方法能够确诊大疱性类天疱疮(BP)、妊娠疱疹、瘢痕性类天疱疮、大疱性扁平苔藓、线状IgA大疱性皮病。 | ||
搜索关键词: | 一种 bp180 nc16a ige 抗体 免疫 检测 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
一种抗BP180NC16A IgE抗体的酶联免疫检测试剂盒,包括检测试剂,其特征在于,所述检测试剂的制备方法包括以下步骤:步骤11:向E.coli DH5α感受态细胞悬液中加入重组质粒pGEX‑2T抗BP180NC16A的DNA,表达抗BP180 NC16A蛋白;步骤12:对所述抗BP180 NC16A蛋白进行提纯,得到纯化的抗BP180 NC16A蛋白;步骤13:对所述纯化的抗BP180 NC16A蛋白进行浓缩,得到浓缩的抗BP180 NC16A蛋白;步骤14:向所述浓缩的抗BP180 NC16A蛋白中加入PBS,使其稀释至500μg/mL,得到抗原包被液;步骤15:对所述抗原包被液进行包被后封闭,得到所述检测试剂。
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