[发明专利]一种肝癌组织特异性RNA干扰系统及其建立和应用方法有效
申请号: | 201210556854.9 | 申请日: | 2012-12-19 |
公开(公告)号: | CN103088064A | 公开(公告)日: | 2013-05-08 |
发明(设计)人: | 樊嘉;史颖弘;彭远飞;丁振斌 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/113;C12N15/66;A61K48/00;A61P35/00 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹;王婧 |
地址: | 200032 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种肝癌组织特异性RNA干扰系统及其建立和应用方法。所述的肝癌组织特异性RNA干扰系统由AFP-Cre载体和LoxP-shRNA载体组成,AFP-Cre载体和LoxP-shRNA载体均由慢病毒载体构建而成,其中,AFP-Cre载体含有一个AFP启动子和位于其下游的Cre重组酶基因,LoxP-shRNA载体含有一个经过改造的U6启动子和位于其下游的shRNA序列,LoxP-shRNA载体中所含的经过改造的U6启动子为在U6启动子中插入一个可指示AFP-Cre/LoxP-shRNA系统是否工作的结构的U6启动子,所述的可指示AFP-Cre/LoxP-shRNA系统是否工作的结构为LoxP-CMV-eGFP-LoxP。应用本发明获得的RNA干扰作用具有肝癌组织特异性高、作用长效、高效、指示良好、操作简便等特点。本发明使肝癌RNA干扰靶向治疗成为可能,并极大地方便了相关研究分析,可广泛应用于肝癌治疗及基础研究。 | ||
搜索关键词: | 一种 肝癌 组织 特异性 rna 干扰 系统 及其 建立 应用 方法 | ||
【主权项】:
一种肝癌组织特异性RNA干扰系统,其特征在于,由AFP‑Cre载体和LoxP‑shRNA载体组成,AFP‑Cre载体和LoxP‑shRNA载体均由慢病毒载体构建而成,其中,AFP‑Cre载体含有一个AFP启动子和位于其下游的Cre重组酶基因,LoxP‑shRNA载体含有一个经过改造的U6启动子和位于其下游的shRNA序列,LoxP‑shRNA载体中所含的经过改造的U6启动子为在U6启动子中插入一个可指示AFP‑Cre/LoxP‑shRNA系统是否工作的结构的U6启动子,所述的可指示AFP‑Cre/LoxP‑shRNA系统是否工作的结构为LoxP‑CMV‑eGFP‑LoxP。
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