[发明专利]引物及该引物质谱检测PIK3CA基因热点突变的方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，提供了一种引物及该引物质谱检测PIK3CA基因热点突变的方法，包括如下步骤：⑴定位PIK3CA基因的热点突变位点；⑵根据这些突变位点两端的DNA序列设计出用于扩增反应的引物和用于延伸反应的引物；⑶扩增反应；⑷SAP酶（碱性磷酸酶）处理；⑸延伸反应；⑹使用树脂纯化延伸反应的产物；⑺将树脂纯化过的产物转移到芯片上；⑻将芯片置于质谱仪中，运行检测程序；⑼读取并分析检测数据，确定PIK3CA基因目的位点的基因型。相对于传统的检测方法，本发明具有灵敏度高，准确率高，通量高，成本低的特点。

主权项

引物，包括扩增引物和延伸引物，其特征在于：所述的扩增引物序列如下：SEQ ID NO:15’‑ACGTTGGATGAACTGAGCAAGAGGCTTTGG‑3’SEQ ID NO:25’‑ACGTTGGATGTCCATTTTTGTTGTCCAGCC‑3’SEQ ID NO:35’‑ACGTTGGATGGCAATTTCTACACGAGATCC‑3’SEQ ID NO:45’‑ACGTTGGATGTGTGACTCCATAGAAAATC‑3’SEQ ID NO:55’‑ACGTTGGATGGCAATTTCTACACGAGATCC‑3’SEQ ID NO:65’‑ACGTTGGATGTGTGACTCCATAGAAAATC‑3’S EQ I D NO:75’‑ACGTTGGATGAACTGAGCAAGAGGCTTTGG‑3’SEQ ID NO:85’‑ACGTTGGATGTCCATTTTTGTTGTCCAGCC‑3’；所述的延伸引物序列如下：SEQ ID NO:95’‑TCCAGCCACCATGAT‑3’SEQ ID NO:105’‑CCTCTCTCTGAAATCACT‑3’SEQ ID NO:115’‑CACGAGATCCTCTCTCT‑3’SEQ ID NO:125’‑GAAACAAATGAATGATGCAC‑3’。