[发明专利]引物及该引物检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的方法

摘要

本发明涉及引物及该引物检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的方法，包括（1）提取RNA；（2）RNA反转录合成cDNA；（3）以cDNA为模板，分别以BCR(p210)-F和ABL(p210)-R为上下游引物，BCR(p190)-F和ABL(p190)-R为上下游引物进行第一轮PCR扩增，获得扩增产物；（4）以ABLKinase-F和ABL Kinase-R为上下游引物进行第二轮PCR扩增；（5）扩增产物测序。本发明还公开了利用巢式PCR获得BCR/ABL融合基因中ABL激酶区片段，再利用特异性引物进行测序的方法，在一个反应体系中可以检测所有常见的BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变，降低了实验的成本，极大的提高了基因测序结果的准确性和灵敏度。

主权项

引物，包括扩增引物和测序引物，其特征在于：所述扩增引物序列如下：BCR_p210‑F:5’‑TGACCAACTCGTGTGTGAAACTC‑3’、ABL_p210‑R：5’‑TCCACTTCGTCTGAGATACTGGATT‑3’、BCR_p190‑F:5’‑ACCGCATGTTCCGGGACAAAAG‑3’、ABL_p190‑R：5’‑ACAGCATTCCGCTGACCATCAATAAG‑3’、所述测序引物序列如下：ABL Kinase‑F：5’‑TGGTTCATCATCATTCAACGGTGG‑3’、ABL Kinase‑R：5’‑AGACGTCGGACTTGATGGAGAACT‑3’。