[发明专利]一种基于单链DNA核酸适配体修饰氧化石墨烯涂层的固相微萃取头制备方法

摘要

本发明公开了一种基于单链DNA修饰氧化石墨烯涂层的新型固相微萃取头的制备方法，按以下步骤进行：（1）对石英纤维进行硅烷化处理；（2）在石英纤维表面涂渍多孔聚合物溶液；（3）重复涂渍多孔聚合物涂层；（4）硅烷化处理；（5）在PBS缓冲液、催化剂EDC溶液、NHS溶液及氧化石墨烯水溶液的混合液中，插入硅烷化多孔聚合物涂层石英纤维；（6）在同一石英纤维上重复步骤（4）及（5）若干次；（7）将氧化石墨烯/多孔聚合物涂层石英纤维取出，插入到PBS缓冲液、EDC溶液、NHS溶液及核酸适配体溶液的混合液。本发明克服了常规涂渍方法固载率低、易脱落、不稳定等缺点，并且显著提高核酸适配体固载量，增强SPME富集效率。

主权项

一种基于单链DNA修饰氧化石墨烯涂层的新型固相微萃取头的制备方法，按以下步骤进行：（1）对石英纤维进行丙酮洗、苯洗、碱洗、酸洗、高温活化，然后用具有不饱和双键的硅烷化试剂在纤维表面进行硅烷化处理；（2）在聚合溶剂中加入功能单体、交联剂及引发剂，充分混合制得多孔聚合物溶液，取一定量所述多孔聚合物溶液于试管中，插入硅烷化石英纤维，通氮气除氧后，密封试管口，水浴中热引发共聚反应；聚合一定时间，取出石英纤维，置于干燥箱中于一定温度下老化一定时间；（3）在同一根石英纤维上重复步骤（2）若干次，即在石英纤维表面重复涂渍多孔聚合物涂层；（4）用具有氨基的硅烷化试剂对得到的多孔聚合物涂层石英纤维进行硅烷化处理；（5）在PBS缓冲液、催化剂EDC溶液、NHS溶液及氧化石墨烯水溶液的混合液中，插入硅烷化多孔聚合物涂层石英纤维，室温反应一定时间，取出纤维，置于干燥箱中于一定温度下老化；（6）在同一根石英纤维上依次重复步骤（4）及（5）若干次；（7）将第（6）步中最后得到的氧化石墨烯/多孔聚合物涂层石英纤维取出，插入到PBS缓冲液、EDC溶液、NHS溶液及核酸适配体溶液的混合液中，室温反应一定时间，取出后用PBS缓冲液清洗，氮气吹干，保存。