[发明专利]一种制备脑钠肽的方法及应用无效
| 申请号： | 201210578484.9 | 申请日： | 2012-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN103014014A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 张培影 | 申请（专利权）人： | 张培影 |
| 主分类号： | C12N15/16 | 分类号： | C12N15/16;C12N15/70;G01N33/74;C07K16/26 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 221009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种制备脑钠肽的方法，该方法包括：改造全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列，去除大肠杆菌稀有密码子；将改造后的脑钠肽编码基因序列插入表达载体中，并用大肠杆菌菌株转化表达；将转化表达菌株接种于LB培养基，IPTG诱导；所得菌体破菌，离心分离，过Ni-NTA柱纯化；本发明制备脑钠肽操作非常简单，制备成本低，成品产率高，纯度高而且具有高生物活性，作为抗原物质可进行动物免疫，筛选相关抗体，同时为尽快建立国内临床化学诊断急需的校准品制备平台，研制诊断试剂标准物质和参考品奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 脑钠肽 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种制备脑钠肽的方法，其特征在于，该方法包括：1)改造全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列，去除大肠杆菌稀有密码子；2)将步骤1)中改造后的脑钠肽编码基因序列插入表达载体中，并用大肠杆菌菌株转化表达；3)将转化表达菌株接种于LB培养基，IPTG诱导；4)所得菌体破菌，离心分离，过Ni‑NTA柱纯化；其中，步骤1)中改造后的全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列为：1 ATGGACCCGC AGACCGCTCC GTCTCGTGCT CTGCTGCTGC TGCTGTTCCT GCACCTGGCT61 TTCCTGGGTG GTCGTTCTCA CCCGCTGGGT TCTCCGGGTT CTGCTTCTGA CCTGGAAACC121 TCTGGTCTGC AGGAACAGCG TAACCACCTG CAGGGTAAAC TGTCTGAACT GCAGGTTGAA181 CAGACCTCTC TGGAACCGCT GCAGGAATCT CCGCGTCCGA CCGGTGTTTG GAAATCTCGT241 GAAGTTGCTA CCGAAGGTAT CCGTGGTCAC CGTAAAATGG TTCTGTACAC CCTGCGTGCT301 CCGCGTTCTC CGAAAATGGT TCAGGGTTCT GGTTGCTTCG GTCGTAAAAT GGACCGTATC361 TCTTCTTCTT CTGGTCTGGG TTGCAAAGTT CTGCGTCGTC ACTAG
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