[发明专利]使用捕获标记物的三磷酸化寡核苷酸的纯化有效
| 申请号： | 201280015575.X | 申请日： | 2012-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN103492405B | 公开（公告）日： | 2017-02-15 |
| 发明（设计）人： | J·路德维希;M·戈尔德克;B·斯普罗特 | 申请（专利权）人： | 波恩莱茵弗里德里希·威廉大学 |
| 主分类号： | C07H21/02 | 分类号： | C07H21/02 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038 | 代理人： | 李瑛 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明涉及使用捕获标记物制备三磷酸修饰的寡核苷酸的方法。该方法可以以高产量和适用于药物应用的纯度合成和纯化三磷酸修饰的寡核苷酸。 | ||
| 搜索关键词： | 使用 捕获 标记 磷酸化 寡核苷酸 纯化 | ||
【主权项】：
制备式(I)的寡核苷酸的方法，其中V1、V3、V5、W1、W2和W3为O；V2、V4和V6为OH，X是NH，Z表示捕获标记物，其为C10‑C18烷基残基或F3C(CF2)6F2C‑，Y表示连接所述捕获标记物与X的键或连接物，其中所述连接物选自‑CH2‑CH2‑[(O‑CH2CH2)]3‑和‑CH2‑CH2‑CH2‑，和ON表示包含至少4个核苷酸结构单元的寡核苷酸，所述方法包括下列步骤：(a)将式(IIa)的化合物与氧化剂反应，其中V1、V3、V5、V4、V6、W1、W2、W3和ON如上限定，以获得式(IIb)的化合物其中V1、V3、V5、V2、V4、V6、W1、W2、W3和ON如上限定，(b)将式(IIb)的化合物与式(III)的捕获标记物试剂反应，Z‑Y‑XH (III)其中X、Z和Y如上限定，以获得包含式(I)的寡核苷酸的反应产物，和(c)将步骤(b)的反应产物与能够与所述捕获标记物相互作用的捕获试剂接触，其中所述接触在允许寡核苷酸(I)与所述反应产物中所含的其它物质分离的条件下进行，其中能够彼此相互作用的捕获标记物和捕获试剂选自：(i)C10‑C18烷基残基，和对疏水基团具有亲和性的色谱材料；和(ii)F3C(CF2)6F2C‑和对氟化的基团具有亲和性的色谱材料。
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