[发明专利]发光聚合物循环扩增

摘要

本发明涉及一个用于探测在液体试样中具有高敏感度的被分析物的发光免疫分析方法。本发明提供了一个独特的组合(i)利用具有小的传感表面积用以结合被分析物分子的探针，(ii)利用一个结合有多个结合分子和多个发光标记的高分子量的支化聚合物，并且(iii)具有免疫复合物结构的探针循环地返回至试剂容器和扩增容器1-10次并且重复与试剂和扩增聚合物的反应，以改善探测水平的敏感度。对每个循环，发光信号的比噪音提高显著。

主权项

一个探测在液体试样中的被分析物的方法，包括的步骤有：(a)获得一探针，其具有被固定在该探针梢端上的第一抗体，其中该梢端表面的直径≤5毫米；(b)将该探针梢端浸入包含具有被分析物的样品溶液的样品容器中，将被分析物与在探针梢端的第一抗体结合；(c)将该探针梢端浸入包含试剂溶液的试剂容器，该试剂溶液包括和一结合配对的第一成员结合的第二抗体分子以结合该试剂和被分析物；(d)将该探针梢端浸入含第一洗液的第一洗涤容器中来洗涤探针梢端；(e)将该探针梢端浸入含有扩增溶液的扩增容器中，该扩增溶液中含有一聚合物，该聚合物结合有至少5个分子的该结合配对的第二成员和至少25个荧光标记，以在该探针梢端上形成该被分析物，该第一抗体，该第二抗体，和该结合配对的第一和第二成员间的免疫复合体，其中该聚合物是支化的，并且其分子量至少为约一百万道尔顿，发光标记的分子量小于2,000道尔顿；(在扩增容器中横向地流动扩增溶液)(f)将该探针梢端浸入含第二洗液的第二洗涤容器以洗涤探针梢端；(g)重复步骤(c)至(f)1‑10次，并且(h)通过测定在探针梢端的发光信号来探测形成的免疫复合物，其中该第一抗体和该第二抗体是针对该被分析物的抗体。