[发明专利]用于对抗体的糖基化进行测定的方法有效
| 申请号： | 201280056607.0 | 申请日： | 2012-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN103959063B | 公开（公告）日： | 2016-11-09 |
| 发明（设计）人： | 德尔菲娜·贾加;哈米德·莫克安娜;斯特凡娜·马丁内斯;米歇尔·芬克 | 申请（专利权）人： | CISBIO生物试验公司 |
| 主分类号： | G01N33/542 | 分类号： | G01N33/542 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人： | 洪俊梅;张淑珍 |
| 地址： | 法国*** | 国省代码： | 法国;FR |
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| 摘要： | 本发明涉及用于对抗体与存在于细胞表面上的Fc受体的结合进行检测的方法，并涉及用于对抗体的糖基化水平进行测定的方法。本发明还涉及用于实施所述方法的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 抗体 糖基化 进行 测定 方法 | ||
【主权项】：
一种用于对测试抗体的糖基化水平进行测定的方法，所述方法包括如下步骤：‑通过实施如下体外方法测定糖基化或去糖基化水平已知的数种竞争性抗体的EC50：通过与参比抗体进行竞争，对所述竞争性抗体与存在于测量介质中的细胞膜或完整细胞表达的Fc受体的结合进行测定的体外方法，其中，对于每种竞争性抗体，所述体外方法包括如下步骤：(i)用FRET伴侣对的第一成员对所述Fc受体进行直接或间接标记，或者向所述介质中引入其Fc受体已预先被所述FRET伴侣对的第一成员直接标记的细胞膜或完整细胞；(ii)向所述测量介质中加入所述竞争性抗体；(iii)向所述测量介质中加入用所述FRET伴侣对的第二成员直接或间接标记的固定量的所述参比抗体；(iv)对FRET信号进行测量，与不存在所述竞争性抗体时测得的信号相比，在存在所述竞争性抗体的情况下测得的信号的降低表示所述竞争性抗体与所述Fc受体的结合；以及(v)对所述竞争性抗体的EC50进行测定，其特征在于，用不同量的竞争性抗体重复步骤(ii)；然后‑通过使用糖基化或去糖基化水平待测定的所述测试抗体替代所述糖基化或去糖基化水平已知的竞争性抗体来实施上述定义的体外方法，测定所述测试抗体的EC50；以及‑通过将所述测试抗体的EC50与所述糖基化或去糖基化水平已知的竞争性抗体的EC50相比较，测定所述测试抗体的糖基化水平。
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