[发明专利]绞股蓝内生真菌及其用途

摘要

本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的绞股蓝内生真菌是从双子叶纲、葫芦目、葫芦科绞股蓝属的绞股蓝活体植株中分离出的内生真菌。该菌株在国家知识产权局专利局指定保藏单位中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心保藏，保藏日期为2012年11月26日，保藏登记号为CGMCC NO6882。经形态学鉴定为子囊菌亚门[Ascomycotina]，核菌纲[Pyrenomycetes]，球壳目[Sphaeriales]，黑孢壳科[Melanosporaceae]，毛壳菌属[Chaetomium sp]。本发明还公开了该菌株核糖体RNA（rRNA）内转录间隔区（ITS）序列（GenBank序列号JN180937.1）。本发明最显著的特征是该菌株经过发酵，能分泌皂苷元、多糖、黄酮、有机酸及醌类等多种天然活性成分，具有广谱抗菌作用的同时，具有抗癌、抗氧化、抗糖尿病等药效作用，是新型天然活性药物的重要微生物资源。

主权项

一种绞股蓝内生真菌菌株的用途，所述绞股蓝内生真菌命名为毛壳菌（Chaetomium sp.）JY25，其保藏登记号为CGMCC NO：6882，保藏日期为2012 年11 月，其特征为：所述绞股蓝内生真菌菌株在制备抗菌发酵液中的用途，所述抗菌发酵液采用以下方法制备获得：0.25 g/mL 绞股蓝汁浸提液：取10 g 绞股蓝粉末加入40 mL 的蒸馏水，调pH 8.0～9.0，85～95℃，搅拌浸提5～10 min，1000 rpm 离心10 min，取上清液即得；孢子悬液的制备：取绞股蓝内生真菌编号为JY25 的菌株，接种于PDA 固体培养基上，28℃培养7d，用微量移液器移取1 mL无菌水冲洗真菌孢子，装入有玻璃珠的无菌水三角瓶中，充分振荡制成孢子悬液，用血球计数板计数并调整孢子悬液浓度为1×107 CFU/mL；PDA 液体培养基：为不加琼脂的PDA 双抗培养基；将绞股蓝内生真菌的孢子悬液以3 % 的接种量加入含有1 % 的绞股蓝汁浸提液的PDA 液体培养基中，调节培养液初始pH 为5.0，装液量为100 mL/250 mL摇瓶，28℃ 160 rpm 摇床培养9 d得到所述抗菌发酵液。