[发明专利]一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法

摘要

本发明公开了一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，通过无菌苗培育、菌剂制备、悬浮液接种法、炼苗、菌根苗培育、检测确认步骤，攻克了夏块菌人工接种的难题，与现有培育方法相比较，本发明以华山松、板栗、云南松为宿主，将夏块菌孢子在相对无菌的条件下，即杜绝真菌的竞争和多数霉菌侵染的条件下，足量与夏块菌宿主树种根部接触，在一定时间内保持夏块菌孢子单一的感染优势，形成稳固和大量的夏块菌菌根。

主权项

一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，其特征在于：包括如下步骤，（1）培育宿主植物苗，具体如下，A、采集、遴选宿主植物种子；所述宿主植物选用云南松、华山松、板栗之一种；B、处理宿主植物种子；将步骤A收集的种子水选去出空壳，用30％的H2O2浸泡处理40分钟后，用蒸馏水冲洗，直至无H2O2气味为止；C、制备培养基；将蛭石与泥炭土按体积比1：1混合装入育苗框内，经高温121‑126℃高压1.5kg/cm2灭菌2小时以上，形成无菌基质育苗框；D、培育宿主植物；将经步骤B处理后的植物种子及时播入无菌基质育苗框内，然后放置于温室内催芽，出芽后移入大棚育株，直至长出根苗；（2）制备菌剂，具体如下，A、收集和保存菌种；采集夏块菌子实体，先用刷体轻轻洗净表面泥土，再在 75％的酒精中浸泡 3min对其表面灭菌，同时再在酒精灯火焰上快速灼烧，继续灭菌，然后置于经高温高压灭菌后的河沙中，于3‑5℃的温度下冷藏保存备用，所述河沙采用高温121‑126℃高压1.5kg/cm2灭菌2小时以上；B、制备菌剂；其配制方法如下，第一步，先称取一定量的块菌，用75％的酒精中浸泡 1‑3分钟对其表面灭菌，然后再在酒精灯火焰上快速灼烧，继续灭菌，置于灭菌后的操作台上，用酒精灭菌后的打浆机将其粉碎成粒径小于lmm悬浮液，使菌种的孢子出壳，悬浮液中块菌与蒸馏水体积比为1：5；第二步，将高吸水性丙烯酸树脂与块菌悬浮液按体积比1：400配制；第三步，将吲哚乙酸速溶后配制60PPM浓度的蒸馏水溶液；第四步，将第二步制作的悬浮液与第三步制作的蒸馏水溶液按体积比1:1配制成块菌接种剂；（3）接种，采用悬浮液接种法，具体如下，A、整理育好的宿主植物苗，减去多余的根、叶；B、在接种杯内填入经消毒杀菌的无菌土，无菌土填装量约占接种杯容积的1/3，再将宿主植物苗放入杯中央；C、向宿主植物苗根部撒上块菌悬浮液菌剂，使之附着在根系上；D、装填接种培育基质，将根系覆盖；（4）炼苗；刚接种块菌的植株先放置于温度在15‑25℃之间，基质的湿度保持在50‑80％的炼苗室内育苗架上培育15‑30天，使菌种在宿主上寄生成功；（5）培育菌根苗；将已经寄生成功的植株移出到玻璃大棚的育苗架上培育6‑24个月，成为可供大田栽培的商品苗。