[发明专利]一种测定重组人胶质细胞源性神经营养因子活性的细胞学方法有效
| 申请号： | 201310059658.5 | 申请日： | 2013-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN103146798A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 曹杰 | 申请（专利权）人： | 潍坊易思特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02 |
| 代理公司： | 潍坊正信专利事务所 37216 | 代理人： | 王伟霞 |
| 地址： | 261025 山东省潍坊*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种测定重组人胶质细胞源性神经营养因子活性的细胞学方法,包括如下步骤：构建表达质粒pcDNA3.1-hGFRα1，然后制备稳定表达hGFRα1的HEK293细胞；构建表达质粒pcDNA3.1-hRET，再制备能够同时表达hGFRα1和hRET以及荧光素酶报告系统的HEK293细胞；将待测rhGDNF加入到同时表达hGFRα1和hRET以及荧光素酶报告系统的HEK293细胞中，培养后测定荧光强度F1；同时设置没有加入待测rhGDNF的空白对照组，培养后测定荧光强度F2；将F1、F2进行比较。本发明能够有效测定重组人胶质细胞源性神经营养因子（rhGDNF）活性，测定结果准确可靠。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 测定 重组 胶质 细胞 神经 营养 因子 活性 细胞学 方法 | ||
【主权项】：
一种测定重组人胶质细胞源性神经营养因子活性的细胞学方法,其特征在于：包括如下步骤：S1、构建表达质粒pcDNA3.1‑hGFRα1，然后用转染法制备稳定表达hGFRα1的HEK293细胞；S2、构建表达质粒pcDNA3.1‑hRET，然后以步骤S1中制备的稳定表达hGFRα1的HEK293细胞为基础，用转染法制备能够同时稳定表达hGFRα1和hRET以及荧光素酶报告系统的HEK293细胞；S3、将待测rhGDNF加入到步骤S2得到的同时稳定表达hGFRα1和hRET以及荧光素酶报告系统的HEK293细胞中，培养后测定荧光强度F1；同时设置没有加入所述待测rhGDNF的空白对照组，培养后测定荧光强度F2；S4、将F1、F2进行比较，若F1＞F2，则说明待测的rhGDNF具有活性；若F1≤F2，则说明待测的rhGDNF不具有活性。
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