[发明专利]一种慢病毒载体及其病毒颗粒的制备和应用无效
| 申请号： | 201310062193.9 | 申请日： | 2013-02-27 |
| 公开（公告）号： | CN103290056A | 公开（公告）日： | 2013-09-11 |
| 发明（设计）人： | 叶军;陈海旭 | 申请（专利权）人： | 上海诺百生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 胡美强;沈利 |
| 地址： | 200233 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种慢病毒载体及其病毒颗粒的制备和应用。其以慢病毒载体pLenti6.3/V5-DEST为骨架，将BamHI和XhoI酶切位点之间的片段替换为多克隆位点片段，并且按转录方向在该多克隆位点片段的3’端插入IRES-GFP片段，所述的多克隆位点依次为：BamHI，PacI，NheI，AscI，SwaI，PmeI，所述IRES-GFP片段是以pIRES2-EGFP载体为模板，由上游引物和下游引物经过PCR扩增而制得的，其中上下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4、5所示。本发明使用价格低廉的化学试剂即可完成，并且制得病毒颗粒滴度高、活性好，在侵染目的细胞中达到很好的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 载体 及其 颗粒 制备 应用 | ||
【主权项】：
一种慢病毒载体，其特征在于，其以慢病毒载体pLenti6.3/V5‑DEST为骨架，将慢病毒载体pLenti6.3/V5‑DEST的BamHI和XhoI酶切位点之间的片段替换为多克隆位点片段，并且按转录方向在该多克隆位点片段的3’端插入IRES‑GFP片段，所述的多克隆位点依次为：BamHI，PacI，NheI，AscI，SwaI，PmeI，所述IRES‑GFP片段是以pIRES2‑EGFP载体为模板，由上游引物和下游引物经过PCR扩增而制得的，其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
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