[发明专利]利用诱导固化作用的耐砷细菌原位修复砷污染土壤的方法

摘要

本发明涉及一种利用诱导固化作用的耐砷细菌原位修复砷污染土壤的方法，该方法首先通过逐次增加营养肉汤培养基中的砷含量，分离出一种耐高浓度砷环境能产生较多尿素分解酶的耐砷细菌；然后将耐砷细菌置于含有尿素酶和CaCl2的营养汤培养基中，富集得到具有钙化作用耐砷细菌菌液；再将富集得到钙化作用耐砷细菌CR5菌液与含砷的污染土壤中混合形成混合溶液，使得混合液pH呈现微弱碱环境至pH为8-9，将混合溶液置于湿润环境下培养，钙化作用耐砷细菌通过诱导固化作用将富含砷污染土壤中砷得到固定，使砷污染土壤得到原位修复。该方法操作简便、易于控制，成本低，可广泛用于重金属土壤污染的修复。

主权项

一种利用诱导固化作用的耐砷细菌原位修复砷污染土壤的方法，其特征在于按下列步骤进行：a、选用砷污染严重地区土壤置于带盖的灭菌瓶中，将土壤样品置于营养肉汤锥形瓶中，营养肉汤pH为8‑8.5，砷含量为100 mg L‑1,然后将锥形瓶置于转速为130 rpm min‑1 ，温度为30℃的条件下培养48 h，得到菌液；b、将培养得到的菌液分别依次接入砷含量为100 mg L‑1、250 mg L‑1和500mg L‑1的营养肉汤培养基中，按常规方法分离得到耐砷细菌，该耐砷细菌在基因库的代码为CR5，编号为HQ331532；c、然后将耐砷细菌CR5置于质量含量为2%的尿素酶、20‑ 60 mM L‑1 CaCl2和砷含量为100‑ 500 mg L‑1的营养汤培养基中，将混合液置于转速为130rpm min‑1 ，温度为30℃的条件下培养5‑7天，富集得到钙化作用耐砷细菌CR5菌液，所得到的菌液pH为8‑9；d、将富集得到具有钙化作用耐砷细菌CR5菌液100‑300 ml与50‑100g含砷量为200‑600 mg Kg‑1的污染土壤进行混合，形成混合溶液，混合液pH呈现微弱碱环境至pH为8‑9，将混合溶液置于湿润环境下培养7‑15天后终止实验，钙化作用耐砷细菌CR5通过钙化作用将富含砷污染土壤中砷得到固定，砷污染土壤得到原位修复，阻止其向周围土壤及地表或地下水中迁移。