[发明专利]用于同时检测沙门菌枸橼菌变形菌和爱德华菌的多重PCR引物及其设计方法有效
| 申请号： | 201310072599.5 | 申请日： | 2013-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN103146827A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 陈琼;孔繁德;徐淑菲;赵冉;周昱;杨涛;陈永锋;连玉华 | 申请（专利权）人： | 厦门市农产品质量安全检验测试中心;厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361012 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 用于同时检测沙门菌枸橼菌变形菌和爱德华菌的多重PCR引物及其设计方法，涉及沙门氏菌等的检测。沙门氏菌引物对应的PCR扩增片段为526bp，弗氏枸橼酸杆菌引物对应的PCR扩增片段为161bp，奇异变形杆菌引物对应的PCR扩增片段为396bp，迟缓爱德华菌引物对应的PCR扩增片段为330bp。1设计多重PCR引物组合；2对引物组合中的引物进行筛选，保留不能合成引物二聚体的引物；3判断所保留引物的竞争优劣状态，将步骤2保留不能合成引物二聚体的引物的GC%和碱基数进行比较，选取GC含量高的判断为竞争状态优势引物，转步骤5；否则转步骤4；4再次筛选竞争状态劣的引物；5对竞争状态优引物扩增。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 同时 检测 沙门 枸橼 变形 爱德华 多重 pcr 引物 及其 设计 方法 | ||
【主权项】：
用于同时检测沙门氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌和迟缓爱德华菌的多重PCR引物，其特征在于为：S.spp.F1：5’‑GCCGGTAAACTACACGATGA‑3’；S.spp.R1：5’‑GAGTTACTGAACCAACAGCT‑3’；C.freu.F1：5’‑AACATAGCGATGGACAACTGA‑3’；C.freu.R1：5’‑TTAGCAAAAATTTAAGCCGGT‑3’；P.mira.F1：5’‑TTTATCAATAGCCTCAAACCCT‑3’；P.mira.R1：5’‑TGCGTCACCCTCTAACTCATCC‑3’；E.tarda.F1：5’‑CTGGGCAAGTATCCGACCTC‑3’；E.tarda.R1：5’‑GGTAACCGTATCGGCGTAAG‑3’；其中，S．spp.为沙门氏菌的英文缩写，C．freu.为弗氏枸橼酸杆菌的英文缩写,P．mira.为奇异变形杆菌的英文缩写，E．tarda.为迟缓爱德华菌的英文缩写；S.spp.F1和S.spp.R1为根据沙门氏菌FimA基因设计的上游引物F1和下游引物R1；C.freu.F1和C.freu.R1为根据弗氏枸橼酸杆菌Idh基因设计的上游引物F1和下游引物R1;P.mira.F1和P.mira.R1为根据奇异变形杆菌IdsC基因设计的上游引物F1和下游引物R1；E.tarda.F1和E.tarda.R1为根据迟缓爱德华菌FimA基因设计的上游引物F1和下游引物R1；所述沙门氏菌引物对应的PCR扩增片段大小为526bp，弗氏枸橼酸杆菌引物对应的PCR扩增片段大小为161bp，奇异变形杆菌引物对应的PCR扩增片段大小为396bp，迟缓爱德华菌引物对应的PCR扩增片段大小为330bp。
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