[发明专利]鲤鱼糖转运载体蛋白Sglt1兔抗血清的制备方法无效
申请号: | 201310084523.4 | 申请日: | 2013-03-18 |
公开(公告)号: | CN103204932A | 公开(公告)日: | 2013-07-17 |
发明(设计)人: | 聂国兴;张建新;王俊丽;侯彩霞;闫潇;张新胜 | 申请(专利权)人: | 河南师范大学 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/06 |
代理公司: | 新乡市平原专利有限责任公司 41107 | 代理人: | 于兆惠 |
地址: | 453007 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种鲤鱼糖转运载体蛋白Sglt1兔抗血清的制备方法。本发明的技术方案要点为:鲤鱼糖转运载体蛋白Sglt1兔抗血清的制备方法,包括以下步骤:(1)克隆鲤鱼肠道糖转运载体蛋白Sglt1的基因;(2)构建糖转运载体蛋白Sglt1的基因工程菌;(3)糖转运载体蛋白Sglt1基因工程菌的诱导表达与鉴定;(4)制备糖转运载体蛋白Sglt1抗原;(5)免疫兔子;(6)采血样测定鲤鱼肠道糖转运载体蛋白Sglt1的效价;(7)颈动脉采血制备糖转运载体蛋白Sglt1的兔抗血清;(8)免疫组织化学方法检测。本发明采用表达跨膜蛋白的具有抗原决定簇部分基因片段作为抗原蛋白代替全长基因,解决了跨膜蛋白无法表达的难题。 | ||
搜索关键词: | 鲤鱼 转运 载体 蛋白 sglt1 血清 制备 方法 | ||
【主权项】:
鲤鱼糖转运载体蛋白Sglt1兔抗血清的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)克隆鲤鱼肠道糖转运载体蛋白Sglt1的基因,通过分析膜蛋白Sglt1的三维结构、跨膜区和抗原决定簇,利用原核表达具有抗原决定簇的部分Sglt1基因片段作为免疫抗原蛋白代替表达全长基因;(2)构建糖转运载体蛋白Sglt1的基因工程菌;(3)糖转运载体蛋白Sglt1基因工程菌的诱导表达与鉴定;(4)制备糖转运载体蛋白Sglt1抗原;(5)免疫兔子;(6)采血样测定鲤鱼肠道糖转运载体蛋白Sglt1的效价;(7)颈动脉采血制备糖转运载体蛋白Sglt1的兔抗血清;(8)免疫组织化学方法检测。
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