[发明专利]一种贴壁分选卵巢肿瘤侧群细胞的方法有效
申请号: | 201310097217.4 | 申请日: | 2013-03-22 |
公开(公告)号: | CN104059880B | 公开(公告)日: | 2017-02-08 |
发明(设计)人: | 姜桦;马晓玲;陈彤 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属妇产科医院 |
主分类号: | C12N5/095 | 分类号: | C12N5/095 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 20001*** | 国省代码: | 上海;31 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明属于细胞生物学领域,涉及肿瘤干细胞研究,具体涉及一种贴壁分选卵巢肿瘤侧群细胞的方法。本发明方法简化了卵巢肿瘤SP细胞分选过程,采用改良的孵育液,可有效的用于贴壁培养的卵巢肿瘤细胞系的SP细胞分选;不需要酶解消化过程,细胞直接在贴壁的状态下进行孵育染色,完成染色后再将细胞酶解成单细胞,在悬浮状态上机分选,可以提高分选时的细胞活性。本方法能简便、快速、有效分选得到SP细胞,可明显节省实验流程操作时间,获得的SP细胞可用作肿瘤干细胞的表面标志物,对后续的实验研究具有明显的实用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 分选 卵巢 肿瘤 细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种贴壁分选卵巢肿瘤侧群细胞的方法,其特征在于,将细胞直接在贴壁的状态下进行孵育染色,完成染色后再将细胞酶解成单细胞,在悬浮状态上机分选,获得侧群细胞;其包括步骤:1)进行人卵巢肿瘤细胞系细胞培养,所述的人卵巢肿瘤细胞系是人卵巢肿瘤细胞系ES‑2和OVCAR‑3;2)培养的细胞以5×105/L的密度接种于培养器皿中,使其贴壁生长,直接Hoechst 33342染色孵育90分钟,无需每15分钟振荡混匀,其中,采用的孵育液由下述的成分组成,其PH值须调整到7.0;3)孵育后用预冷HBSS液洗涤并酶解成单细胞悬液,离心弃去上清液后重悬浓缩细胞,在悬浮状态上机分选,获得侧群细胞。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于复旦大学附属妇产科医院,未经复旦大学附属妇产科医院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201310097217.4/,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:品字型阵列天线自动俯仰装置
- 下一篇:一种从獐芽菜中提取苦龙胆酯甙的方法