[发明专利]凝结芽孢杆菌的芽孢制剂的制备方法无效
| 申请号： | 201310101181.2 | 申请日： | 2013-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN103160455A | 公开（公告）日： | 2013-06-19 |
| 发明（设计）人： | 王云龙;吴勃 | 申请（专利权）人： | 杭州保安康生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/07 |
| 代理公司： | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人： | 曾少丽 |
| 地址： | 310005 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种凝结芽孢杆菌的芽孢制剂的制备方法，包括：(a)斜面菌体活化；（b）凝结芽孢杆菌的种子罐培养；（c）凝结芽孢杆菌的固体发酵；将步骤（b）中的培养基按1%～10%的重量比接入固体发酵培养基中，采用半封闭式发酵48～72h。本发明采用半封闭式固体发酵工艺，在发酵过程中物料处于半封闭状态，与少量空气接触，生长期可以充分利用残余氧气使凝结芽孢杆菌菌体大量繁殖，生长后期氧气大量减少，刺激芽孢快速形成，同时可以代谢较多的L-乳酸，解决发酵过程中产酸不足的情况，通过夺氧作用抑制杂菌的生长，解决固体发酵污染的情况。 | ||
| 搜索关键词： | 凝结 芽孢 杆菌 制剂 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种凝结芽孢杆菌的芽孢制剂的制备方法，包括：(a)斜面菌体活化将凝结芽孢杆菌（ACCC10229）接种至一级斜面培养基上，30℃～45℃培养20～32h；（b）凝结芽孢杆菌的种子罐培养将步骤（a）中的活化后的结芽孢杆菌单菌落接种于二级培养液中，装液量为50～100mL/500mL，30℃～45℃、160～300rpm/min条件下培养20～32h；然后将培养后的种子液体积百分比0.5～10%，在培养基上30℃～45℃、160～300rpm/min条件下培养20～36h；（c）凝结芽孢杆菌的固体发酵将步骤（b）中的培养基按1%～10%的重量比接入固体发酵培养基中，培养基含水量控制在49%～58%，pH范围在6.0～7.0，曲房相对湿度保持在85%以上，料温控制在30℃～45℃，采用半封闭式发酵48～72h；或者（b’）将步骤（a）中的活化后的结芽孢杆菌单菌落接种于二级茄型培养瓶中，30℃～45℃培养36～48h；（c’）按10～15瓶二级茄型培养瓶培养基接入1.0t固体发酵培养基中，培养基含水量控制在49%～58%，pH范围在6.0～7.0，曲房相对湿度保持在85%以上，料温控制在30℃～45℃，采用半封闭式发酵48～72h。
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