[发明专利]一种密度感应淬灭菌的检测方法有效
| 申请号： | 201310108647.1 | 申请日： | 2013-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN103215342A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 张晓华;汤开浩;史晓翀;张蕴慧 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/34 | 分类号： | C12Q1/34;C12Q1/02;C12R1/01 |
| 代理公司： | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人： | 曾庆国 |
| 地址： | 266003 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种密度感应淬灭菌的检测方法，是将待检测菌株加入到溶解有AHL的pH值为6.7的 PIPES缓冲液中制成待检液，再将待检液上清与添加有X-gal的A. tumefaciens A136报告菌的菌液进行反应；反应结束后检测反应液的OD492和OD630值，并通过公式 (0.653×OD492-OD630)/(0.267×OD630-OD492)计算标准化β-半乳糖苷酶活性值，通过比较标准化β-半乳糖苷酶活性值进行差异显著性分析，最终确定待检测菌株是否为密度感应淬灭菌。本发明的方法具有简单快速，灵敏度高，高通量检测，排除了大部分假阳性菌株，可以有效确定待测菌株是否为密度感应淬灭菌株，从而显著提高了密度感应淬灭菌株筛选的准确性和针对性，节省了时间和人力成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 密度 感应 灭菌 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种密度感应淬灭菌的检测方法，其特征在于，所述的方法是将待检测菌株加入到溶解有AHL的、pH值为6.7的 PIPES缓冲液中制成待检液，再将待检液上清与添加有X‑gal的A. tumefaciens A136报告菌的菌液进行反应；反应结束后检测反应液的OD492和OD630单位的值，并通过公式 (0.653×OD492‑OD630)/(0.267×OD630‑OD492)计算标准化β‑半乳糖苷酶活性值，通过比较阴性对照的标准化β‑半乳糖苷酶活性值进行差异显著性分析，最终确定待检测菌株是否为密度感应淬灭菌。
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