[发明专利]水稻或水稻加工品中Bt基因快速检测方法有效
申请号: | 201310119561.9 | 申请日: | 2013-04-08 |
公开(公告)号: | CN103205496A | 公开(公告)日: | 2013-07-17 |
发明(设计)人: | 肖红梅;刘佳;宋尚新;刘梅;张艳芳;索娜;江玲 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;傅婷婷 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明属于农产品检验领域,公开了水稻或水稻加工品中Bt基因快速检测方法。该检测方法以步骤(1)提取的水稻或水稻加工品基因组DNA为模板,以上游外引物F3:SEQ ID NO.1、下游外引物B3:SEQ ID NO.2、上游内引物FIP:SEQ ID NO.3、下游内引物BIP:SEQ ID NO.4进行LAMP扩增;根据反应结果判断水稻或水稻加工品中是否含有Bt基因。本发明通过一系列的LAMP反应体系、反应条件优化实验及引物特异性实验,成功地建立了米制品中Bt基因的LAMP快速检测方法,检出限达到0.005%,该法具有操作简单、不需要特殊仪器、结果易于观察的优点,适合于基层推广。 | ||
搜索关键词: | 水稻 加工品 bt 基因 快速 检测 方法 | ||
【主权项】:
水稻或水稻加工品中Bt基因快速检测方法,其特征在于包含如下步骤:(1)提取水稻或水稻加工品基因组DNA;(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,以上游外引物F3:SEQ ID NO.1、下游外引物B3:SEQ ID NO.2、上游内引物FIP:SEQ ID NO.3、下游内引物BIP:SEQ ID NO.4进行LAMP扩增;(3)扩增产物用两种方法进行检测:A.2%琼脂糖凝胶电泳,电泳完毕,凝胶成像系统拍照成像,如果电泳结果呈现LAMP典型的梯状条带,则说明水稻或水稻加工品中含有Bt基因;B.取15μL反应产物,加入2μL SYBR Green Ⅰ染料,片刻后对结果直接进行可视化观察,若反应液显示绿色荧光,则样品中含有Bt基因,若显示浅橙色则为阴性结果。
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