[发明专利]一种提取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA的方法有效
申请号: | 201310124795.2 | 申请日: | 2013-04-11 |
公开(公告)号: | CN103160499A | 公开(公告)日: | 2013-06-19 |
发明(设计)人: | 金姝;朱晴晖;邹玉涵;黄德魁;童平 | 申请(专利权)人: | 上海市普陀区人民医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海百一领御专利代理事务所(普通合伙) 31243 | 代理人: | 马育麟 |
地址: | 200060 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供一种提取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA的方法。该方法先按如下成份及终浓度配置裂解液(pH8.0):20mMTris;2mMNa2-EDTA;1.0%Tritonx-100;20mg/ml溶菌酶;0.05g/ml-0.15g/mlchelex100;90ug/ml-100ug/ml溶葡萄球菌酶;1.8mg/ml-2mg/ml蛋白酶K;其余为无菌水;然后取5-10个生长于固体培养基上的金黄色葡萄球菌菌落,混悬于100ul上述裂解液中,56℃30min,100℃10min,12000rpm离心10min;最后取上清液用于PCR反应即可。 | ||
搜索关键词: | 一种 提取 耐甲氧 西林 金黄色 葡萄球菌 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种提取耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA的方法,其特征在于,其包括如下步骤:1)裂解液的配置,各组分含量如下:20mM Tris; 2mM Na2‑EDTA; 1.0%Triton x‑100; 20mg/ml溶菌酶; 0.05g/ml‑0.15g/ml chelex100; 90ug/ml ‑100ug/ml溶葡萄球菌酶; 1.8 mg/ml ‑2mg/ml蛋白酶K;其余为无菌水;pH8.0;2)取5‑10个生长于血平板上的金黄色葡萄球菌菌落,混悬于100ul上述裂解液中,56℃ 30min,100℃ 10min,12000rpm离心10min;3)最后取上清液。
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