[发明专利]体外复制的人线粒体DNA质粒及其构建方法有效
申请号: | 201310128777.1 | 申请日: | 2013-04-15 |
公开(公告)号: | CN104031929A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
发明(设计)人: | 易俊波 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66;C12N15/65 |
代理公司: | 深圳市顺天达专利商标代理有限公司 44217 | 代理人: | 汪丽 |
地址: | 518000 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种体外复制的人线粒体DNA重组质粒,该重组质粒包含完整的人线粒体DNA和大肠杆菌复制子基因;大肠杆菌复制子基因插入人线粒体DNA的D-LOOP区。其构建方法包括以下步骤:提取完整的人线粒体DNA;从pUC19质粒中扩增出大肠杆菌复制子基因、或扩增出大肠杆菌复制子基因和抗性筛选基因,作为插入人线粒体DNA中的外源基因;以及同时酶切人线粒体DNA和外源基因,将酶切过的人线粒体DNA和外源基因经去磷酸化处理后连接在一起,制得人线粒体DNA重组质粒。本发明一方面可实现人线粒体在原核生物中的复制,另一方面由于插入的为非编码区,不会对人线粒体DNA的编码功能造成影响。 | ||
搜索关键词: | 体外 复制 线粒体 dna 质粒 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种人线粒体DNA重组质粒,其特征在于,所述重组质粒包含完整的人线粒体DNA和大肠杆菌复制子基因;所述大肠杆菌复制子基因插入人线粒体DNA的D‑LOOP区。
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