[发明专利]一种用于检测合成肽抗原浓度的检测方法有效
申请号: | 201310136201.X | 申请日: | 2013-04-18 |
公开(公告)号: | CN104111251A | 公开(公告)日: | 2014-10-22 |
发明(设计)人: | 孟丽媛 | 申请(专利权)人: | 申联生物医药(上海)有限公司 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 蒋亮珠 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种用于检测合成肽抗原浓度的检测方法,包括以下步骤:(1)配制标准合成肽溶液,将已知浓度的合成肽溶液先用蒸馏水稀释至浓度为1mg/ml,然后继续稀释至不同梯度浓度;(2)配制合成肽样品:将未知浓度的合成肽样品采用蒸馏水连续稀释至不同梯度浓度;(3)将A试剂置于比色皿中,加入待检测样品,混合均匀;(4)继续加入B试剂,于室温避光反应20分钟,反应完全后,利用分光光度计测量OD750的吸光值;(5)根据标准合成肽溶液样品各梯度样品对应的数据绘制标准曲线,然后对合成肽样品吸光值对应标准曲线进行换算,计算得到相应的浓度值。与现有技术相比,本发明具有灵敏性强、样品用量小、检测范围广、针对性强等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 合成 抗原 浓度 方法 | ||
【主权项】:
一种用于检测合成肽抗原浓度的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)配制标准合成肽溶液,将已知浓度的合成肽溶液先用蒸馏水稀释至浓度为1mg/ml,然后继续稀释至不同梯度浓度,即为配制的标准合成肽溶液样品:(2)配制合成肽样品:将未知浓度的合成肽样品采用蒸馏水连续稀释至不向梯度浓度;(3)以碱性酒石酸铜溶液作为A试剂,斐林试剂作为B试剂,将A试剂置于比色皿中,加入待检测样品,混合均匀,A试剂与待检测样品的体积比为5∶1;所述的待检测样品为标准合成肽溶液样品或者合成肽样品;(4)继续加入B试剂,于室温避光反应20分钟,反应完全后,利用分光光度计测量OD750的吸光值,所述B试剂与A试剂的体积比为8∶1;(5)根据标准合成肽溶液样品各梯度样品对应的数据绘制标准曲线,然后对合成肽样品吸光值对应标准曲线进行换算,计算得到相应的浓度值。
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