[发明专利]一种连翘花中单体化合物的分离纯化方法

摘要

本发明涉及一种连翘花中单体化合物的分离纯化方法，是从连翘花中分离纯化单体化合物连翘酯苷I和连翘酯苷A的方法；本发明采用体积分数为95%的乙醇溶液回流提取制备连翘花粗提取物，采用聚酰胺树脂柱先以水洗脱去除水溶性杂质，再用体积分数为30%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩得连翘花聚酰胺粗分离物，再采用高速逆流色谱仪对粗分离物进行分离纯化，得到纯度高于94%的连翘酯苷I和连翘酯苷A。本发明采用了合理的溶剂系统，控制了高速逆流色谱仪的主机转速、流动相流速和检测器波长等条件，用本发明方法可得到纯度较高的连翘酯苷I和连翘酯苷A。该分离条件容易控制，分离时间短，分离得到的化合物纯度高。

主权项

一种连翘花中单体化合物的分离纯化方法，其特征在于包括如下步骤： （1）取连翘花药材，样品经粉碎机粉碎,过40目筛，得干燥的连翘花粉末；以连翘花粉末与乙醇质量比1:10加入体积分数为95%的乙醇，回流提取2.0‑3.0h，过滤；将滤渣重复上述步骤，再提取2次，合并滤液，减压浓缩至浸膏状，得连翘花提取物； （2）将上述步骤制得的连翘花提取物加适量水混悬后，过PA6或PA66型聚酰胺树脂柱，使聚酰胺树脂对提取液中的物质充分吸附：先用水溶液进行充分洗脱除去水溶性杂质，再用体积分数为30％的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩干燥，即得聚酰胺粗分离物； （3）在分液漏斗中配制两相溶剂系统,该溶剂系统由乙酸乙酯、乙醇、乙酸和水组成，其中乙酸乙酯：乙醇：乙酸：水为4：1：0.25：6v/v，配好后充分振摇，在室温下静置过夜；使用前分别取分液漏斗中的上相作为HSCCC的固定相，下相作为HSCCC的流动相，超声脱气30‑60min；取步骤（2）中的聚酰胺粗分离物，用相同体积的上相和下相溶解样品； （4）将溶剂系统的上相注入高速逆流色谱仪分离管中，待上相充满整个管路后调整主机转速为850rpm，然后以1.5mL/min的流速泵入下相，待流动相从柱出口流出，两相在分离管中达到动态平衡后，由进样阀注入（3）中的样品溶液；在280nm波长下检测，记录色谱图，根据色谱图收集得到单体化合物连翘酯苷I和连翘酯苷A。