[发明专利]灰杨组培体系的建立方法

摘要

本发明公开了灰杨组培体系的建立方法，以灰杨茎段为外植体材料，通过诱导生根，移栽等步骤，为灰杨生产走上工厂化、产业化之路提供依据。通过本发明的方法，达到了无性系建立、快速繁殖、工厂化育苗的目的。

主权项

灰杨组培体系的建立方法，其特征在于包括如下步骤：(1)选取健壮灰杨植株，将灰杨的叶片垂直于主脉剪伤，接种于包含或组成为MS+Kinetin0.08‑0.12mg/L+NAA0.2‑0.4mg/L+2，4‑D0.4‑0.6mg/L的培养基，暗室培养，每16‑24天继代一次；(2)取疏松、生长旺盛的愈伤组织，转入液体培养基，所述培养基为步骤(1)的培养基基础上加入25‑35g/L的蔗糖，在20‑30℃条件下避光振荡培养，转速为100‑200r/min；继代培养前，将悬浮液用150‑250目钢网过滤，除去大量损伤细胞的残存碎片，再转入新鲜培养基，继续悬浮培养，继代3～4从而建立体系；(3)从继代培养的组培苗中选取健壮、生长整齐的组培苗，剪成1.5‑2.5cm左右的茎尖茎段，植入生根培养基中，所述生根培养基为包含或组成为1/2MS+AgNO33‑5mg/L+NAA0.04‑0.06mg/L的培养基；(4)选择生长旺盛、根系发达的健壮组培苗，将瓶口的包扎物逐渐打开，使组培苗逐步适应外界环境，由开小口到完全敞开约需6‑10天，在开瓶口后加入少量的水，使用玻璃罩扣住在阳光下驯化6‑8天后移栽到花盆，移栽前把附着于幼苗根部的培养基冲洗干净；任选地，在移栽到花盆之前使用一定浓度的多菌灵溶液泡洗；移栽到花盆后仍然用玻璃罩扣养，逐步揭开玻璃罩，直到苗木在花盆中发芽生长再移入大田；灰杨组培苗移栽时，幼苗期空气相对湿度控制在80％以上，温度为18～25℃，以及适宜的光照强度。