[发明专利]基于DNA自组装的非酶SNP检测方法有效
| 申请号： | 201310145787.6 | 申请日： | 2013-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN103290111A | 公开（公告）日： | 2013-09-11 |
| 发明（设计）人： | 曾令文;吴薇;陈俊华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 方振昌 |
| 地址： | 510530 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了基于DNA自组装的非酶SNP检测方法，包括如下步骤：设计分离捕获探针CP、单链MP、探针AP1和AP2；将CP、MP、核酸连接酶和样本加入反应液中，混匀，反应完全；将反应液中生成的双链DNA解链为单链DNA；将连接有分离标记的单链DNA分离，清洗去除其他游离DNA链；将清洗后的带分离标记的单链DNA、AP1、AP2加入反应液，反应完全以形成自组装双链；将连接有分离标记的DNA链分离，清洗去除其他游离DNA链；通过检测清洗后的DNA链中双链DNA的量，确定SNP的量。本方法具有灵敏度高、特异性好、操作简单用时短，对样本要求低等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 dna 组装 snp 检测 方法 | ||
【主权项】：
基于DNA自组装的非酶检测SNP 的方法，包括如下步骤：1）设计分离捕获探针CP、单链MP、探针AP1和AP2，其中：CP和MP可分别和目标序列的5’端和3’端互补为双链，在形成的双链中，CP和MP之间存在单链缺刻，该单链缺刻左侧或右侧的核苷酸与目标序列的SNP位点互补；CP的一个末端连接有分离标记；自组装AP1的5’端和3’端可分别和AP2的3’端和5’端互补，自组装形成双链DNA，AP1和AP2的5’端和3’端中至少部分序列可与MP的一端互补为双链；2）将CP、MP、核酸连接酶和样本加入反应液中，混匀，反应完全；3）将反应液中生成的双链DNA解链为单链DNA；4）将连接有分离标记的单链DNA分离，清洗去除其他游离DNA链；5）将清洗后的带分离标记的单链DNA、AP1、AP2加入反应液，反应完全以形成自组装双链；6）将连接有分离标记的DNA链分离，清洗去除其他游离DNA链；7）通过检测清洗后的DNA链中双链DNA的量，确定SNP的量。
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