[发明专利]一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌及其构建方法和蛋白表达有效
申请号: | 201310157411.7 | 申请日: | 2013-05-02 |
公开(公告)号: | CN103224901A | 公开(公告)日: | 2013-07-31 |
发明(设计)人: | 范代娣;骆艳娥;马晓轩 | 申请(专利权)人: | 西北大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N15/09;C12P21/02;C12R1/19 |
代理公司: | 西安新思维专利商标事务所有限公司 61114 | 代理人: | 李罡 |
地址: | 710068 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌及其构建方法和蛋白表达。利用大肠杆菌发酵生产类人胶原蛋白时,乙酸积累会影响菌体生长及蛋白表达,而现有减少乙酸副产物的方法会降低胶原蛋白产量。本发明以保藏编号为CGMCCNo.0743的大肠杆菌BL21为出发菌,采用Red同源重组,用安普霉素抗性基因替换大肠杆菌基因组上的ptsG基因,然后通过质粒pCP20表达的FLP内切酶消除安普霉素抗性基因,得到敲除ptsG基因的大肠杆菌工程菌CGMCCNo.7331。本发明通过基因工程手段改造大肠杆菌葡萄糖吸收途径,减少乙酸积累,提高类人胶原蛋白的积累,葡萄糖的消耗量减少9%-28%,类人胶原蛋白的产量可提高20%-30%。 | ||
搜索关键词: | 高效 表达 胶原 蛋白 ptsg 基因 重组 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌,其特征在于:所述的重组菌于2013年3月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7331。
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