[发明专利]鹰嘴豆壳二孢叶枯病环介导等温扩增快速检测方法有效
| 申请号： | 201310186323.X | 申请日： | 2013-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN103215375A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 马德英;马丽娟;羌松 | 申请（专利权）人： | 新疆农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 乌鲁木齐中科新兴专利事务所 65106 | 代理人： | 李静 |
| 地址： | 830052 新疆维*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种鹰嘴豆壳二孢叶枯病环介导等温扩增快速检测方法，该方法包括真菌DNA的提取、真菌的环介导等温扩增、显示检测步骤完成，以克服现有技术所需周期长、操作复杂等问题，该方法优点是快速、特异性强、灵敏度高，且成本低，可用于田间鹰嘴豆壳二孢叶枯病的早期诊断和病菌的监测和鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 鹰嘴豆 壳二孢叶枯病环介导 等温 扩增 快速 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种鹰嘴豆壳二孢叶枯病环介导等温扩增快速检测方法，其特征在于按下列步骤进行：a、待检样品或真菌的DNA提取：采用常规真菌DNA提取方法提取待检样品核酸，其中提取样品DNA的OD260/OD280为1.6‑2.0，浓度为10‑100ng/μL；b、进行鹰嘴豆壳二孢叶枯病真菌的环介导等温扩增反应：在装有22μL环介导等温扩增反应液的反应管中加入2μL待检样品模板DNA和1μL Bst DNA聚合酶，于恒温65℃扩增反应30‑60min，将温度调到80℃终止反应，3‑5min后取出待检；c、显色检测：在每个反应管中加入1μL显色剂，直接用肉眼观察颜色变化，反应液颜色变为绿色，即为待检样品中含有或为鹰嘴豆壳二孢叶枯病真菌。
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