[发明专利]生长抑素及其制备方法

摘要

本发明涉及生长抑素及其制备方法，该方法包括以下步骤：使固相合成用树在有机碱存在下与Fmoc-Cys(Trt)-OH进行反应以形成Fmoc-Cys(Trt)-树脂；加入脱帽试剂进行脱帽反应；接着加入溶解于溶剂中的保护氨基酸Fmoc-Ser(tBu)-OH、肽偶联剂、酰胺键形成促进剂和有机碱，使物料进行偶联反应，以形成Fmoc-Ser(tBu)-Cys(Trt)-树脂；循环重复脱帽-偶联步骤，并在每一偶联反应中依次使用形成生长抑素的其它保护氨基酸以最终形成保护的十四肽树脂：Boc-Ala-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Phe-Phe-Trp-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Cys(Trt)-树脂；进行脱保护和切肽反应，以使十四肽从树脂上切割下来并脱除保护基，得到还原型生长抑素；将还原型生长抑素与氧化剂反应，得到环化生长抑素。本发明还提供了由该方法获得的生长抑素。本发明方法具有良好的产业化优点。

主权项

1.制备生长抑素的方法，其包括以下步骤：(a)向经浸泡处理的固相合成用树脂中加入溶解于溶剂中的Fmoc-Cys(Trt)-OH和有机碱，使物料进行反应以形成Fmoc-Cys(Trt)-树脂；(b)向上一步骤所得的肽偶合树脂中加入脱帽试剂，使物料进行反应以脱帽；接着加入溶解于溶剂中的保护氨基酸Fmoc-Ser(tBu)-OH、肽偶联剂、酰胺键形成促进剂和有机碱，使物料进行偶联反应(亦可称为缩合反应)，以形成Fmoc-Ser(tBu)-Cys(Trt)-树脂；(c)循环重复步骤(b)，并在每一循环操作的偶联反应中依次使用下列氨基酸以替换保护氨基酸Fmoc-Ser(tBu)-OH：Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Trp-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Boc-Ala-OH，以最终形成保护的十四肽树脂：Boc-Ala-Gly-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Phe-Phe-Trp-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Cys(Trt)-树脂；(d)向步骤(c)所得十四肽树脂中加入切割液以同时进行脱保护和切肽反应，以使十四肽从树脂上切割下来并脱除保护基，得到还原型生长抑素；(e)将步骤(d)所得还原型生长抑素溶解于酸中，加入氧化剂进行氧化反应，得到下式所示生长抑素：和任选的，(f)对步骤(e)所得生长抑素进行纯化的步骤。