[发明专利]一种循环肿瘤细胞的富集、分析方法

摘要

本发明提供了一种循环肿瘤细胞的富集、分析方法，该方法主要包括：对生物体液样本进行红细胞裂解处理；加入与白细胞、红细胞和/或血小板特异性结合的免疫微珠进行孵育；用滤膜过滤细胞悬液，富集循环肿瘤细胞。本发明对红细胞裂解、免疫微珠法和滤膜法富集CTCs方法的综合及优化，从而极大地提高循环肿瘤细胞的富集效果，该技术对白细胞的去除效率>99.9%，肿瘤细胞的富集效率>80%。同时，本发明还提供一种使用上述循环肿瘤细胞的富集方法的试剂盒，以及提供一种用于富集循环肿瘤细胞的装置。本发明还提供了一种上述富集的循环肿瘤细胞的分析方法，通过该方法，可以实现肿瘤细胞数量、基因突变、基因表达谱等动态变化的分析。

主权项

1.一种循环肿瘤细胞的富集方法，其特征在于，主要包括以下步骤：1)对生物体液样本进行红细胞裂解处理以去除红细胞；2)加入与白细胞、红细胞和/或血小板特异性结合的免疫微珠进行孵育以去除白细胞、血小板及残余的红细胞；3)将去除白细胞、红细胞后的细胞悬液在滤膜上进行过滤，得到富集循环肿瘤细胞的滤膜；所述的免疫微珠上共价或非共价偶联有与白细胞、红细胞和/或血小板特异性结合的抗体；所述的免疫微珠上偶联的抗体选自CD2、CD15、CD16、CD19、CD33、CD41、CD45、CD35、CD235a中的九种；所述红细胞裂解液包括有以下浓度的组份：0.3M～0.32M氯化铵、0.018M～0.022M碳酸氢钾、0.003～0.005M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠，所述的红细胞裂解液还包括有0.01％～0.2％的甲醛。