[发明专利]羊胚胎中提取RNA的方法有效
| 申请号： | 201310243706.6 | 申请日： | 2013-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN103320424A | 公开（公告）日： | 2013-09-25 |
| 发明（设计）人： | 田可川;吴伟伟;哈尼克孜;徐新明;张艳花;狄江;阿扎提;付雪峰;于丽娟;玛尔孜亚;拉扎提;阿米娜;田月珍;刘春洁 | 申请（专利权）人： | 新疆维吾尔自治区畜牧科学院畜牧科学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 乌鲁木齐合纵专利商标事务所 65105 | 代理人： | 汤建武;汤洁 |
| 地址： | 830000 新疆维吾尔*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明涉及RNA提取技术领域，是一种羊胚胎中提取RNA的方法；其按下述步骤进行：第一步，取100枚至500枚羊胚胎移入离心管中，在离心管中加入0.2ml氯仿，振荡15s后静置2分钟；第二步，将静置后离心管中的混合液在温度为4℃、转速为12000rpm的离心机中离心15分钟后得到上清液。本发明工艺简单，同样数量的羊胚胎提取的RNA较现有技术同样数量的羊胚胎提取的RNA的量有很大的提高，且在提取过程中无RNA损失，提取RNA的羊胚胎可为新鲜羊胚胎或冷冻保存解冻后的羊胚胎，从而降低了生产成本，提高了提取效率。 | ||
| 搜索关键词： | 胚胎 提取 rna 方法 | ||
【主权项】：
一种羊胚胎中提取RNA的方法，其特征在于按下述步骤进行：第一步，取100枚至500枚羊胚胎移入离心管中，在离心管中加入0.2ml氯仿，振荡15s后静置2分钟；第二步，将静置后离心管中的混合液在温度为4℃、转速为12000rpm的离心机中离心15分钟后得到上清液，在上清液中分别加入0.5ml异丙醇、5μg至10μg RNase‑free糖原并混匀得到上清混合液；第三步,将上清混合液在温度为‑20℃下放置8h至10h，然后在温度为4℃、转速为12000rpm的离心机中离心10分钟后取沉淀，在沉淀中加入1ml 体积百分比浓度为75%的乙醇溶液进行洗涤，洗涤后在温度为4℃、转速为7500rpm的离心机中离心5分钟后取沉淀，在沉淀中加入20微升至50微升的DEPC H2O溶解后得到RNA。
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