[发明专利]酮还原酶LEK、编码基因、突变体及应用有效
申请号: | 201310245346.3 | 申请日: | 2013-06-18 |
公开(公告)号: | CN103289970A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 殷晓浦;谢恬;叶婷婷;沈凌宏;曹丹;王秋岩;谌容;裴晓林 | 申请(专利权)人: | 杭州师范大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12P7/62 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;王兵 |
地址: | 310036 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种酮还原酶LEK、编码基因、突变体及在生物催化制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的应用,所述酮还原酶LEK具有SEQ.ID.NO.2所示氨基酸序列95%以上同源性,酮还原酶LEK突变体是将酮还原酶LEK氨基酸序列中第28位的W突变为A获得突变体W28A,本发明开发R型酮还原酶,即酮还原酶LEK,再经定点突变改造该酶并建立辅酶再生循环反应体系,催化制备(R)-CHBE的转化率达到100%和e.e.值大于99%,同时该酶Km值较低,为14.08mM。催化反应体系不需要添加昂贵的辅酶NADPH,降低生产成本;而且在较高底物浓度下可大量制备光学纯度高的产物,生产效率较高,有利于工业化生产。 | ||
搜索关键词: | 还原酶 lek 编码 基因 突变体 应用 | ||
【主权项】:
一种酮还原酶LEK,其特征在于所述酮还原酶LEK具有SEQ.ID.NO.2所示氨基酸序列95%以上同源性。
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