[发明专利]一种鉴定子鼠基因型的PCR方法有效
申请号: | 201310296488.2 | 申请日: | 2013-07-15 |
公开(公告)号: | CN103436603A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 周宇荀;管清华;肖君华;李凯 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达 |
地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种鉴定子鼠基因型的PCR方法,包括:(1)通过Blast两种品系小鼠的线粒体序列,找到4个SNP位点,选取其中一个位点以子代小鼠线粒体DNA为模板进行PCR扩增;(2)PCR结束后对PCR产物凝胶电泳检测,若出现阳性条带,则进行LDR反应;其中,LDR反应中,每一个SNP位点设计三条探针;(3)LDR结束后,对LDR产物进行凝胶电泳检测,电泳结束后,利用软件提取泳道数据,即可。本发明通过鉴定子代小鼠母本,比较子代表型差异,将母体效应和基因类型联系起来,补充了以往研究中通过改变孕鼠的营养状况或药物激素暴露等方式,从环境因素揭示母体效应的不足,扩展了人们对母体效应的遗传学机制的认识。 | ||
搜索关键词: | 一种 鉴定 基因型 pcr 方法 | ||
【主权项】:
一种鉴定子鼠基因型的PCR方法,包括:(1)通过Blast两种品系小鼠的线粒体序列,找到4个SNP位点,选取其中一个位点以子代小鼠线粒体DNA为模板进行PCR扩增;其中,PCR引物为:上游引物:5’‑CATTCTTCATGGCTACTGGATTC‑3’;下游引物:5’‑TGCTCATGGTAGTGGAAGTAGAA‑3’;(2)PCR结束后对PCR产物凝胶电泳检测,若出现阳性条带,则进行LDR反应;其中,LDR反应中,每一个SNP位点设计三条探针,一条为位点通用探针,另外两条位点特异性探针分别为:mtDNA_G:TTGGAGACGTATAGGAAAAGTCAGAC;mtDNA_A:TTTTGGAGACGTATAGGAAAAGTCAGAT;(3)LDR结束后,对LDR产物进行凝胶电泳检测,电泳结束后,利用软件提取泳道数据,即可。
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