[发明专利]一种树木SNP位点基因型检测方法有效
| 申请号： | 201310298853.3 | 申请日： | 2013-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN104293894A | 公开（公告）日： | 2015-01-21 |
| 发明（设计）人： | 张德强;徐煲铧;杜庆章 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 吴贵明;张永明 |
| 地址： | 100083 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种树木SNP位点基因型检测方法。该检测方法包括：步骤S1.采用扩增引物对树木的全基因组DNA进行PCR扩增，得到长度不大于500bp的PCR扩增产物，其中扩增引物具有生物素标记；步骤S2.对步骤S1中得到的PCR扩增产物进行单链制备，得到5’端有生物素标记的DNA单链，DNA单链包含多个待测位点；步骤S3.利用测序引物对步骤S2得到的DNA单链进行焦磷酸测序分析，其中序列读取长度为20～50bp，混合酶用量为390～395μl/plate，荧光底物用量为390～395μl/plate，得到分型结果。该检测方法延长了测序长度，一次测序检测多位点；同时节约了1/3试剂用量，降低了成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 树木 snp 基因型 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种树木SNP位点基因型检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：步骤S1，采用扩增引物对树木的全基因组DNA进行PCR扩增，得到长度不大于500bp的PCR扩增产物，其中所述扩增引物具有生物素标记；步骤S2，对所述步骤S1中得到的PCR扩增产物进行单链制备，得到5’端有生物素标记的DNA单链，所述DNA单链包含多个待测位点；步骤S3，利用测序引物对所述步骤S2得到的所述DNA单链进行焦磷酸测序分析，其中序列读取长度为20～50bp，混合酶用量为390～395μl/plate，荧光底物用量为390～395μl/plate，得到分型结果。
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