[发明专利]一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法

摘要

本发明涉及一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的方法，属于食品添加剂领域。本发明向含有甘草酸(或其盐)的培养基中添加促进剂甘草总提物、或甘草总多糖和/或甘草总黄酮，促进Penicillium purpurogenum Li-3(保藏号:CGMCCNo.5446)诱导产生β-葡萄糖醛酸苷酶，对比不加促进剂产酶提前5～48小时，酶活提高0.5～5倍。用产酶后菌体或含菌体发酵液制备β-葡萄糖醛酸苷酶粗酶制剂，转化甘草总提物或甘草总三萜中甘草酸及其类似物生成GAMG，分离纯化发酵液中GAMG。本发明不仅提高了酶活,而且避免以甘草酸(或其盐)为碳源甘草酸(或其盐)复杂提取分离过程，降低生产成本。

主权项

一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法，其特征在于包含以下步骤：步骤1、配制转化反应体系，其中底物为甘草总提取物和/或甘草总三萜；步骤2、向转化反应体系中加入β‑葡萄糖醛酸苷酶粗酶制剂，转化甘草总提取物和/或甘草总三萜中的甘草酸及其类似物生成GAMG，至产物浓度基本恒定；步骤3、将步骤2中所得的转化发酵液，经过分离纯化得到产品GAMG；其中步骤2中β‑葡萄糖醛酸苷酶粗酶制剂的制备方法为：步骤（1）、先将能诱导产生β‑葡萄糖醛酸苷酶的菌种Penicillium purpurogenum Li‑3接入到斜面培养基上，经培养后得斜面种子，其中Penicillium purpurogenum Li‑3的保藏号为CGMCCNo.5446；步骤（2）、将步骤（1）所得的斜面种子接入种子培养基中，经培养后得到种子液；步骤（3）、将步骤（2）所得的种子液接入到含有甘草酸或甘草酸盐的产酶培养基中发酵培养，其中产酶培养基中含有外源促进剂，促进Penicillium purpurogenum Li‑3诱导产生β‑葡萄糖醛酸苷酶，其中外源促进剂为甘草总提取物、甘草总黄酮和/或甘草总多糖；步骤（4）、从步骤（3）中获得β‑葡萄糖醛酸苷酶粗酶制剂，包括以下一种或几种：(a)含有已经产酶菌体的发酵液组分、（b）已经产酶的菌体发酵液离心后获得的全细胞菌体、（c）已经产酶的菌体破碎细胞后制得的粗酶液、（d）已经产酶的菌体冷冻干燥后制得的冻干粉、（e）含有固体培养和/或半固体培养所产生的β‑葡萄糖醛酸苷酶的组分。