[发明专利]牦牛乳酪蛋白抗凝血肽的制备方法有效
| 申请号： | 201310313774.5 | 申请日： | 2013-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN103388015A | 公开（公告）日： | 2013-11-13 |
| 发明（设计）人： | 谢小冬;高维东;纪银莉;宋礼;文鹏程;孙文静;冯丹;刘恭;何潇;葛静微 | 申请（专利权）人： | 甘肃华羚生物技术研究中心;兰州大学;甘肃华羚酪蛋白股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/16;C07K7/06;C07K7/08 |
| 代理公司： | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人： | 张真 |
| 地址： | 730000 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明利用胰蛋白酶水解牦牛乳酪蛋白制备及分离纯化抗凝血肽，其步骤为：（1）调节反应温度30～50℃，pH5.5～7.5，搅拌，使牦牛乳酪蛋白溶解；（2）加胰蛋白酶水解，维持反应温度30℃，pH5.5～7.5，水解1～4小时；（3）升温至80～100℃，维持5～15分钟，灭活胰蛋白酶；（4）用5mol/L食用级盐酸调节pH 4.6，使酪蛋白在其等电点处析出；（5）4000～10000g离心力，离心5～10分钟，离心除沉淀，留上清液；（6）喷雾干燥上清液；（7）利用葡聚糖凝胶柱对水解产物进行分离纯化；（8）采用琼脂糖-纤维蛋白平板法检测各组分活性；（9）氨基酸序列检测：采用N端序列测定法检测牦牛乳酪蛋白抗凝血肽氨基酸序列。 | ||
| 搜索关键词： | 牦牛 乳酪 蛋白 抗凝 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种牦牛乳酪蛋白抗凝血肽的制备方法，其特征是包括以下步骤：（1）溶解：称取牦牛乳酪蛋白10‑50g，加水500mL，调节反应温度30～50℃，pH5.5～7.5，搅拌，使牦牛乳酪蛋白溶解；（2）酶解：称取0.25g～2.5g胰蛋白酶加入，维持反应温度30～50℃，pH5.5～7.5，反应1～4小时；（3）灭酶，升温至80～100℃，维持5～15分钟；（4）沉淀酪蛋白：用5mol/L盐酸调节pH到4.6，使酪蛋白在其等电点处析出；（5）离心：4000～10000g离心力，离心除去酪蛋白沉淀，留上清液；（6）喷雾干燥：取离心上清液，采用喷雾干燥机，对产品进行喷干，得到牦牛乳酪蛋白抗凝血肽。
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