[发明专利]一种急性分离心肌细胞的方法及装置有效
申请号: | 201310314848.7 | 申请日: | 2013-07-24 |
公开(公告)号: | CN103387956A | 公开(公告)日: | 2013-11-13 |
发明(设计)人: | 岳志杰;余志斌 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第四军医大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12M1/36;C12M1/34 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 陆万寿 |
地址: | 710032 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种急性分离心肌细胞的方法及装置,在心肌细胞分离时心脏消化期间,每隔一段时间加入一定量碱液调节消化液pH,使其稳定的维持在7.40附近,与机体内环境保持一致;能够显著提高心肌细胞分离效果,同时排除心脏体积、消化时间、季节温度对分离效果的影响,增加分离效果的稳定性,获得稳定一致的高质量心肌细胞。 | ||
搜索关键词: | 一种 急性 分离 心肌 细胞 方法 装置 | ||
【主权项】:
一种急性分离心肌细胞的方法,其特征在于,包括以下操作:1)将离体的心脏行主动脉逆行插管后,将心脏悬挂于Langendorff灌流装置中,用消化液37℃恒温恒流灌流心脏;所述的消化液为:心脏灌流液30ml、胶原酶I30mg充分混合;所述的心脏灌流液:MEM5.55g、HEPES sodium salt2.00g、BSA0.5g、去离子水500ml充分混合,pH为7.40;2)采用pH计监测分离过程中消化液pH的变化,依据监测结果,每隔一定的时间加入碱液调节消化液pH为7.40,消化全程维持pH的稳定;3)当消化完成后,取出心脏经剪碎吹打,获得急性分离的心肌细胞。
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