[发明专利]用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法有效
申请号: | 201310357737.4 | 申请日: | 2013-08-16 |
公开(公告)号: | CN103436637A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 吴兴安;刘梓谕;王芳;张晓晓;张芳琳;程林峰;袁利娟;徐志凯 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第四军医大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 西安吉盛专利代理有限责任公司 61108 | 代理人: | 邱志贤 |
地址: | 710032 陕西省西安*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法,该方法主要是根据GenBank数据库中S基因的保守区序列,设计一对特异性引物,以10倍梯度稀释的阳性质粒为标准品,优化反应条件,通过qRT-PCR特异性扩增,建立检测感染Vero E6细胞、感染小鼠与临床患者汉滩病毒核酸的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法,检测灵敏度达到101个拷贝数,并对其敏感性、重复性和特异性进行检验。与常规汉滩病毒检测与鉴定方法相比,该法具有检测标本种类丰富,使用范围大,对比性强,操作步骤少,方便快捷,灵敏度高,重复性高和特异性好,且具有良好的线性关系等优点。为肾综合征出血热的临床、实验室检测以及流行病学研究提供了有力的实验基础。 | ||
搜索关键词: | 用于 病毒感染 快速 检测 鉴定 sybr green real time pcr 方法 | ||
【主权项】:
用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal‑time PCR方法,其特征是:根据汉滩病毒76‑118株S基因保守区序列,设计一对汉滩病毒核酸的实时荧光定量PCR引物,扩增汉滩病毒核酸,准确定量样本中的病毒载量拷贝数。
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