[发明专利]一种提高牛虻抗血栓酶kfpase生物活性的复性方法在审
| 申请号： | 201310388577.X | 申请日： | 2013-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN104419694A | 公开（公告）日： | 2015-03-18 |
| 发明（设计）人： | 秦引林;韩承业 | 申请（专利权）人： | 江苏柯菲平医药股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/68 | 分类号： | C12N9/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210016 江苏省南京市中山*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种提高牛虻抗血栓酶kfpase生物活性的复性方法，属于生物医药技术领域。本发明的基本过程为将变性蛋白通过凝胶过滤柱，在洗脱的过程中逐渐降低尿素的浓度，进而蛋白可以正确折叠而形成天然活性蛋白。本发明的方法不仅操作简便，可以获得高纯度的蛋白并保持很高的蛋白或收率，而且可以显著提高蛋白的生物活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 牛虻 血栓 kfpase 生物 活性 复性 方法 | ||
【主权项】：
一种提高牛虻抗血栓酶kfpase生物活性的复性方法，利用凝胶过滤层析进行，包括以下步骤：(1)柱平衡：用流动相I平衡凝胶过滤柱；泵入5％‑10％柱体积的流动相II；其中流动相I为三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris‑HCl)20‑50mmol／L，pH8.0‑9.5，L‑精氨酸200‑500mmol／L，还原型谷胱甘肽1‑3mmol／L，氧化型谷胱甘肽0.2‑0.6mmol／L，流动相II为尿素6‑8mol／L，三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris‑HCl)20‑50mmol／L，pH8.0‑9.5，L‑精氨酸200‑500mmol／L，还原型谷胱甘肽1‑3mmol／L，氧化型谷胱甘肽0.2‑0.6mmol／L；(2)上样：泵入变性蛋白；(3)洗脱：继续用流动相I洗脱凝胶过滤柱，蛋白在通过凝胶过滤柱时，逐渐将尿素的浓度降低，进而蛋白有足够的时间折叠成天然的形态。
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