[发明专利]DNA结合蛋白的检测方法

摘要

本发明公开了一种DNA结合蛋白的检测方法，包括如下步骤：提供待检测的DNA结合蛋白的样品溶液，在Exo III存在的条件下进行消化反应，反应完全后得到消化液；将消化液加入到扩增体系中，在聚合酶、内切酶和扩增模板存在的情况下，进行等温扩增反应后得到扩增液；将纳米金颗粒溶液与含有第一检测探针和第二检测探针的溶液混合后进行孵育后得到纳米金检测探针溶液；将扩增液和纳米金检测探针溶液混合后对混合液进行检测，完成DNA结合蛋白的检测。这种DNA结合蛋白的检测方法，通过第一检测探针和第二检测探针与扩增产物中靶DNA的结合，使得结合了检测探针的纳米金颗粒发生聚集，导致混合液的颜色发生变化，现象直观，灵敏度较高。

主权项

一种DNA结合蛋白的检测方法，包括如下步骤：提供待检测的DNA结合蛋白的样品溶液，在Exo III存在的条件下进行消化反应，反应完全后得到消化液，其中，未被Exo III切割的DNA的反义链作为引物被保留在所述消化液中；将所述消化液加入到扩增体系中，在聚合酶、内切酶和扩增模板存在的情况下，进行等温扩增反应，反应完全后得到扩增液，其中，所述扩增模板包括n段重复序列以及n‑1段依次连接所述重复序列的连接序列，所述引物与所述重复序列特异性结合，所述连接序列包括所述内切酶的酶切位点，n为不小于2的整数，所述引物扩增后得到所述扩增模版的互补序列，所述扩增模版的互补序列被所述内切酶切割形成n段包含所述重复序列的靶DNA；提供纳米金颗粒溶液，并将所述纳米金颗粒溶液与含有第一检测探针和第二检测探针的溶液混合后进行孵育，孵育完成后得到纳米金检测探针溶液，其中，所述第一检测探针与所述靶DNA特异性互补，所述第二检测探针与所述靶DNA特异性互补；将所述扩增液和所述纳米金检测探针溶液混合，反应完全后对混合液进行检测，完成所述DNA结合蛋白的检测。