[发明专利]一种筛选原肌球蛋白相关激酶B抑制剂高通量筛选方法在审
| 申请号： | 201310421153.9 | 申请日： | 2013-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104458671A | 公开（公告）日： | 2015-03-25 |
| 发明（设计）人： | 严明;张陆勇;胡洁;高鹏 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211200 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种筛选原肌球蛋白相关激酶B抑制剂高通量筛选方法，包括以下步骤：(1)原肌球蛋白相关激酶B抑制剂筛选模型的建立与优化：进行激酶浓度、温孵时间、底物浓度、ATP浓度实验；(2)阳性药验证模型可靠性：选用合适浓度的激酶，ATP Km，底物Km，激酶和底物每孔分别加入2μl，再按浓度梯度每孔加入4μl阳性药，加入2ul ATP开始反应，按优化时间室温孵育；每孔加入10μl终止液终止反应，室温孵育1小时后检测，分析数据得阳性药IC50；(3)高通量筛选模型验证：按照上述步骤操作，使用BiomekNXP自动化加样仪器和Multidrop自动分液器进行加样，计算Z因子。本发明的优点主要有：1)简便快捷；2)灵敏度高；3)结果稳定可靠，重现性好，可用于高通量筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 肌球蛋白 相关 激酶 抑制剂 通量 方法 | ||
【主权项】：
一种原肌球蛋白相关激酶B抑制剂高通量筛选模型，其特征在于，包括步骤： (1)激酶抑制剂筛选模型的建立与优化； (2)阳性药验证模型可靠性； (3)高通量筛选模型验证。
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