[发明专利]一种乳酸菌和酵母菌共生发酵的微生物制剂的生产方法

摘要

本发明公开了一种乳酸菌和酵母菌共生发酵的微生物制剂的生产方法，其特征是将分离自内蒙古民族乳制品酸马奶酒中的乳酸菌和酵母菌进行共生组合筛选，选出一组具有互相促进作用的屎肠球菌HE5和酿酒酵母J-4。在优化的脱脂乳培养基上培养筛选出的屎肠球菌HE5和酿酒酵母J-4时，乳酸菌活菌数达到2.88×109CFU/mL；酵母菌的活菌数达到3.3×108CFU/mL，双菌培养促进乳酸菌生长作用较好。将培养收获的双菌冷冻干燥得到一种乳酸菌和酵母菌共生发酵的微生物制剂，所述微生物制剂共生作用好、产酸能力强。

主权项

一种乳酸菌和酵母菌共生发酵的微生物制剂的生产方法，其特征在于按下述步骤完成：（1）乳酸菌的活化和酵母菌的活化：将冻干保存的屎肠球菌Enterococcus faecium HE5菌株接种至MRS液体培养基中，在其最适增殖温度37℃下培养18h，连续增殖三代，备用；将冻干保存的酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeJ‑4接种于YEPD液体培养基中，30℃、130r/min摇床培养至36h，连续增殖三代，备用；其中屎肠球菌Enterococcus faeciumHE5菌株的保藏编号为CGMCC No.7766,酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeJ‑4的保藏编号为CGMCC No.7765，均于2013年06月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址100101北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；（2）乳酸菌和酵母菌混合发酵：将活化三代的屎肠球菌HE5与酿酒酵母J‑4接入优化的脱脂乳培养基，先经过30℃、130r/min摇床培养至12h，后进入37℃恒温静止培养至36h；（3）将上述发酵液经6000r/min离心15min，弃上清，用等量的灭菌生理盐水清洗离心菌体2～3次，收集菌体；（4）添加冷冻保护剂：将收集的菌体，按照菌体:保护剂=1:10（g/ml）比例将保护剂加入制得的菌体中，振荡混匀；（5）冷冻干燥：将加入保护剂的发酵液放入‑80℃冰箱中预冻12h，再将其迅速放入真空冷冻干燥机中，在‑53℃，68×10‑3Mb的条件下干燥18h左右，即可收获成品；（6）包装：铝箔袋真空包装。