[发明专利]一种诱导川贝母胚状体产生的方法

摘要

本发明公开了一种诱导川贝母胚状体产生的方法，属于生物技术领域。该方法选取川贝母植株的幼嫩叶鞘为外植体，通过消毒后进行愈伤组织诱导，将愈伤组织接入MS+头孢噻肟钠培养基中培养50天后愈伤组织表面产生有胚状体，再将胚状体以1～3个为1组切下，接入其快速生长培养基MS+6-BA0.1～1mg·L-1+头孢噻肟钠100～450mg·L-1中，在培养温度为15～25℃、每天光照6～20h、光照强度为800～2500lx的培养条件下培养60天后，胚状体可生长为绿色的川贝母小植株。本发明成功地利用了一定浓度的抗生素类化学因子诱导出川贝母胚状体，为川贝母胚状体的繁殖提供了一条新途径。

主权项

一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：它包括以下步骤：S1：选取川贝母植株的幼嫩叶鞘为外植体，用流水冲洗干净后，用浓度为70%～75%的酒精消毒30～60s，然后用浓度为0.1%～0.15%的升汞消毒4～10min，最后用无菌水震荡洗3～6次，洗后用已灭菌的滤纸吸干材料表面的水分，将经过处理的叶鞘接种于培养基MS+6‑BA 0.5～2.0mg·L‑1+2，4‑D 1～2mg·L‑1+IAA 0.1～1mg·L‑1 +蔗糖20～60g·L‑1+琼脂5.0～7.0g·L‑1中进行培养，所采用的培养温度16～20℃、每天光照6～14h、光照强度为1000～2000lx的条件下诱导愈伤组织；S2：选取经过S1步骤处理的颜色为白色和淡黄色的愈伤组织，切成大小为0.5～2.5cm2，然后接入MS+头孢噻肟钠200～600mg·L‑1培养基中培养40～60天得到愈伤组织胚状体；S3：将愈伤组织胚状体以1～3个为1组切下，接入其快速生长培养基MS+6‑BA 0.1～1mg·L‑1+头孢噻肟钠100～450mg·L‑1中，所采用的培养温度为15～25℃、每天光照6～20小时、光照强度为800～2500lx的培养条件下培养50～60天后，得到川贝母小植株。