[发明专利]一种快速鉴定甘薯茎腐病抗性的方法

摘要

本发明涉及一种快速鉴定甘薯茎腐病抗性的方法，其包括以下操作步骤：将甘薯主茎或侧枝修剪成带有3～4片展叶的茎枝，室温条件下预培养2～3天；待茎枝长出须根后，将茎枝平置，在茎枝中间位置且两节之间，用移液器枪头扎1个小洞且不穿透茎枝，然后将茎枝平置于铺有浸透无菌水的滤纸的密闭塑料盒内，并将扎有小洞的一侧朝上，吸取15～25μL1×108cfu/mL的茎腐病病原菌菌悬液，注入小洞内接种培养；培养20～24h后，观察病害情况并对甘薯茎枝进行病害等级鉴定。本发明具有操作简单快速、实用性强、可操作性强和鉴定结果重复性和可靠性较高优点，对于筛选甘薯抗茎腐病优质种质资源具有潜在的社会经济意义。

主权项

一种快速鉴定甘薯茎腐病抗性的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）茎枝的处理与预培养：取生长正常、整齐、无病虫害的甘薯主茎或侧枝，用无菌手术刀将甘薯主茎或侧枝修剪成带有3～4片展叶的茎枝，剪后用无菌水洗去剪口处流出的汁液；将已修剪清洗的茎枝放入灭菌广口瓶中进行预培养，灭菌广口瓶装有占其体积1/3的蒸馏水或无菌水，室温条件下培养2～3天；（2）茎腐病病原菌菌悬液的制备：将甘薯茎腐病病原菌菌株H12接种于改良营养琼脂培养基中，于28 ℃划线培养40～48 h后，用无菌水配成浓度为1×108 cfu/mL的茎腐病病原菌菌悬液；（3）茎枝的接种培养：待茎枝长出须根后，将茎枝平置，在茎枝中间位置且两节之间，用移液器的枪头扎1个小洞且不穿透茎枝，然后将茎枝平置于铺有浸透无菌水的滤纸的密闭塑料盒内，并且将扎有小洞的一侧朝上，吸取15～25 μL步骤（2）制得的菌悬液，注入茎枝小洞内进行接种，以无菌水作为空白对照，接种后将塑料盒盖好密封，置于30 ℃的光照培养箱内，培养20～24 h；（4）病害症状观察与等级鉴定：培养20～24 h后，观察病害情况，并对甘薯茎枝进行病害等级鉴定。