[发明专利]一种鸡新城疫二联体疫苗及其制备方法

摘要

本发明属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种以HN蛋白和鸡α干扰素为有效成分的二联体疫苗及其制备方法。该二联体疫苗，通过利用基因工程技术将HN基因和鸡α干扰素基因转化感染BHK-21细胞并充分表达获得目的蛋白，将目的蛋白与佐剂混合制备而得疫苗。利用HN基因与鸡α干扰素基因表达蛋白制备的二联体疫苗注入鸡体内时，HN蛋白和α干扰素在鸡体内发挥各自生物学功能，在预防鸡新城疫病毒感染同时，还具有积极的预防和治疗其他种类病毒感染的效果，疫苗总体安全可靠，能够长时间地、持续地诱导机体产生特异性抗体，提高鸡的免疫力，较好的克服了传统疫苗单一预防一种疾病的不足。

主权项

一种预防鸡新城疫疾病的二联体疫苗，其特征在于，该疫苗通过以下方法制得： （1）利用PCR技术扩增鸡α干扰素基因，利用RT‑PCR技术扩增鸡新城疫病毒HN基因；（2）将步骤（1）获得的HN基因和鸡α干扰素基因克隆到真核表达载体质粒pcDNA3.1中，构建重组真核双表达载体质粒pcDNA3.1‑IFN‑HN；（3）将步骤（2）获得的重组真核双表达载体质粒pcDNA3.1‑IFN‑HN转染BHK‑21细胞进行ZeocinTM抗性筛选；  （4）将步骤（3）筛选所得阳性细胞进行培养，使HN基因和鸡α干扰素基因得到充分表达；（5）将步骤（4）HN基因和鸡α干扰素基因所表达蛋白回收纯化获得目的蛋白；（6）将步骤（5）所获得的目的蛋白与佐剂混合制备预防鸡新城疫疾病的二联体疫苗。